猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus)是小猪渗出性皮炎的病原。渗出性皮炎典型病例表现为哺乳猪和断奶仔猪的一种急性和超急性传染病,患猪全身性皮炎可导致腹水和死亡。5-6周龄的小猪通常在感染后4-6d发病。临床症状为皮肤发红且皮肤排出物增多,在腋部和肋部出现薄的、灰棕色片状渗出物,3-5d扩展到全身各处,其颜色很快变化并富含脂质。食欲不振和脱水是本病的特征。目前,我国对渗出性皮炎的报道只限于其病原菌的分离鉴定和抗生素治疗,而对该病的病原学、发病机理及诊断方法等方面的研究尚处于空白。应用细菌分离鉴定、药敏实验等检测方法耗时费力,而间接ELISA检测方法的建立能快速、批量地进行抗体检测,达到渗出性皮炎流行病学调查的目的。本研究对渗出性皮炎的病原进行分离鉴定,利用PCR技术扩增猪葡萄球菌表皮脱落毒素基因,通过连接、转化、酶切等方法构建了表皮脱落毒素的体外表达系统,重组菌命名为pET32a-ExhB,IPTG诱导表达,用表达蛋白作包被抗原,进行间接ELISA抗体检测方法的摸索。结果表明,所分离菌株shgd1是渗出性皮炎的病原,扩增的表皮脱落毒素基因与GENE BANK中发表序列的同源性为98%,成功构建表皮脱落毒素的原核表达系统,使重组菌在大肠杆菌中成功表达,经SDS-PAGE电泳和Western-blot分析,融合蛋白分子量为30ku,初步建立检测猪葡萄球菌抗体的间接ELISA诊断方法,为渗出性皮炎抗体检测试剂盒的研制奠定了基础。