目的 维甲类化合物是维生素A的衍生物，对生物个体的胚胎发育，细胞增殖及细胞分化过程起重要作用。近年来维甲类化合物被广泛应用于肿瘤的预防和治疗研究。文献报道，全反式维甲酸（all-transretinoic acid，ATRA）对多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用，可使肿瘤细胞向终末分化，并能诱导肿瘤细胞凋亡。但其对胆管癌的作用，国内外尚未见报道。本实验通过检测ATRA对体外培养的人胆管癌细胞QBC939的诱导凋亡作用。探讨其对胆管癌细胞生长的影响及其抗癌机制。 方法 体外培养的人胆管癌细胞QBC939经复苏后，实验设空白对照组及实验组，细胞接种于96孔极分组培养。实验组用不同浓度ATRA培养液培养，空白对照组不加ATRA培养液培养。（1）台盼兰染色：每日取出一组对照组及实验组细胞，台盼蓝染色后，于细胞计数板内计数，1w后绘制细胞生长曲线。（2）MTT比色试验：对照组及实验组细胞于不同时间终止实验，终止实验前4h每孔加入20μl MTT，细胞染色后以150μl DMSO溶解，酶联免疫检测仪测定490nm波长的 第四军医人‘了颀十学位论文 一 吸光度（A值），讣算细胞增州抑制’＃。（3）光镜及透射电镜：实验组 及对照组QBC939细胞培养3d后，胰酶消化，PBS洗涤2遍、离心， 3％戊二醛固定，光镜及透射电镜下观察细胞形态。（4）流式细胞仪： QBC939细胞经胰酶消化，PBS洗涤、离心，调整细胞数约10’个厅， 75％乙醇固定，50ug·mlPI染色，流式细胞仪分析细胞周期。 结果（l）不同浓度的ATRA对人胆管癌QBC939细胞的生长均 有抑制作用，且量效时效关系明显。但大剂量则主要导致细胞坏死， 以 10巧mol·L”’ATRA作用效果最好。（2）MTT比色试验提示，QBC939 细胞经 10－’md·L“’ATRA处理后，增殖抑制率随时间延长而增强，其 作用7d的增殖抑制率可达到60．5％。（）光镜下可见细胞由长梭形变 为圆形或椭圆形，某些表型发生改变，透射电镜下观察到凋亡小体。 （4）流式细胞仪结果出现凋亡峰，与对照组细胞相比，实验组细胞周 期延长，主要表现为 oM比例明显升高50．5％，S、GZ n比例下降 39．8％，11．4％。 结论 ATRA可抑制胆管癌细胞株 QBC939细胞的增殖，并诱导癌 细胞凋亡。