论文部分内容阅读
目的：探讨前庭传入性神经元与前庭传出性神经元之间直接的中枢神经通路，并直观地显示出本通路的神经元胞体及其纤维走形。方法：在实验第一部分中，运用顺行、逆行双重荧光神经示踪技术，于大鼠前庭内侧核或外侧核注射绿色顺行荧光示踪剂PHA-L(含荧光素)，在对侧外周前庭注射红色逆行荧光示踪剂5％MFS(含荧光微球)，行脑干连续冰冻切片，在荧光显微镜及激光共聚焦显微镜下观察荧光细胞的分布及形态。在实验第二部分中，运用膜片钳电生理技术，于前庭内侧核放置刺激电极，同侧面神经膝内侧的前庭传出神经元胞体内置入记录电极，行膜片钳的全细胞记录。刺激前庭内侧核的传入神经元，记录传出神经元的突触后电流。在实验第三部分中，于面神经膝内侧的前庭传出神经元细胞群区放置刺激电极，同侧前庭内侧核前庭传入神经元胞体内置入记录电极，给予刺激后记录动作电位；然后运用细胞内示踪技术，导入细胞内示踪剂biocytin，连续冰冻切片后ABC染色、DAB呈色；显微镜下观察染色细胞及其纤维走行，并进行通路重建与显示。结果：第一部分的实验发现红色荧光示踪剂可以标记出前庭传出神经元的胞体及树突；前庭传出神经元主要分布于双侧面神经膝的内侧，背外侧(即group E)及网状结构的桥脑尾状核区，还有小部分位于面神经膝的腹侧，注射对侧脑干的细胞数目多于同侧；分布于面神经膝内侧的神经元多为梭形，分布于面神经外侧的神经元为类圆形或梭形，分布于网状系统的神经元多为三角形，胞体较大。绿色荧光标记的神经纤维为前庭内侧核或外侧核神经元发出的纤维，主要分布于面神经膝的内外侧及网状结构系统。在面神经膝内侧、外侧及网状结构的桥脑尾状核区都能发现被红色、绿色双重荧光标记而呈现黄色的双标细胞。第二部分的实验中发现面神经膝内侧的前庭传出神经元的静息电位约—55mv～—70mv。刺激前庭内侧核的传入神经元，可在传出神经元胞体内记录到突触后电流，以兴奋性突触后电流为主。第三部分的实验中发现，刺激面神经膝内侧的前庭传出神经元细胞群，在同侧前庭内侧核传入神经元的胞体内可记录到动作电位，为锋电位，振幅62.5～65mV，时程约82～90ms。Biocytin细胞内示踪，显示染色的神经元位于前庭内侧核，其纤维末端进入面神经膝内侧的group E区。结论：前庭传入性神经元与前庭传出性神经元之间存在直接的中枢神经通路，而且本通路主要为兴奋性突触联系。通过细胞内示踪技术，可以直观地显示出与前庭传出性神经元相联系的前庭传入性神经元的胞体及其神经纤维。