刺五加和短梗五加叶及果镇静催眠活性对比研究

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刺五加(Acanthopanax senticosu(Rupr.et Maxim.)Harms)为五加科(Araliaceae)五加属(Acanthopanax)的多年生落叶灌木,其干燥根和根茎或茎作为传统中药收载于《中华人民共和国药典》,具有益气健脾,补肾安神之功效;其叶作为地方中药材,标准收载于2001版《黑龙江省中药材标准》,具补益肝肾,益精壮骨之功效;而民间,刺五加叶和果都是加工刺五加茶的原料,常饮安神助眠。其同科同属植物短梗五加(Acanthopanax sessiliflorus(Rupr.et Maxim.)Seem),外观形态与刺五加相似,存在一定的混用现象,如二者的根皮均作为地方药材五加皮的药源,而刺五加茶也常二者混用。近几十年来,由于无序采茎挖根,刺五加药用资源质量显著下降,甚至出现了无合格药材可用的现象。本文以刺五加和短梗五加的可再生资源刺五加叶(AHL)、刺五加果(AHF)、短梗五加叶(ASL)、短梗五加果(ASF)作为实验对象,分别对上述原料的水提取(WE)与乙醇提取物(AE)的镇静催眠活性和作用机制方面进行了对比分析,为刺五加和短梗五加资源的可持续化开发利用提供依据。1、刺五加叶和刺五加果的水提物及醇提物的镇静催眠活性及机制研究分别制备刺五加叶的水提物(AHL-WE)和醇提物(AHL-AE)、刺五加果的水提物(AHF-WE)和醇提物(AHF-AE)。通过观察AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE、AHF-AE对小鼠自主活动的影响,以及与戊巴比妥钠阈下催眠剂量(28 mg/kg,i.p.)和催眠剂量(48 mg/kg,i.p.)联合给药对小鼠睡眠的影响,考察各组提取物的镇静催眠作用,并确定其镇静催眠剂量和亚催眠剂量;通过AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE与5-羟色氨酸(5-HTP)、氟马西尼(FLU)、氨基硫脲(TSC)的联合给药及针对对氯苯丙氨酸(pCPA)诱导失眠小鼠睡眠及脑内海马区神经递质的影响,初步考察AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE的镇静催眠机制。结果显示,AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE均可降低小鼠的自主活动次数,协同阈下剂量戊巴比妥钠提高小鼠入睡率,协同催眠剂量戊巴比妥钠缩短小鼠入睡潜伏期,延长小鼠睡眠持续时间,表现出镇静催眠作用,其催眠剂量和亚催眠剂量分别为32 mg/kg和8 mg/kg;亚催眠剂量的AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE能够协同亚有效剂量的5-羟色氨酸(5-HTP,2.5 mg/kg,i.p.)显著降低小鼠睡眠潜伏期,延长睡眠时间,显著增加小鼠海马5-羟色胺(5-HT)水平;对氯苯丙氨酸(pCPA,100 mg/kg,i.p.)能够显著抑制催眠剂量AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE的镇静催眠效果和小鼠海马5-HT水平的升高;氟马西尼(FLU,8 mg/kg,i.p.)和氨基硫脲(TSC,8 mg/kg,i.p.)有效的拮抗了AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE的镇静催眠作用和小鼠海马γ-氨基丁酸(GABA)水平的升高。结果说明,AHL-WE、AHL-AE、AHF-WE和AHF-AE具有较好的镇静催眠作用,其中镇静催眠活性最强的是AHF-AE,AHF的镇静催眠活性较AHL更稳定,并且各药用部位醇提物的镇静催眠效果比水提物更好,其作用机制可能与5-HT能和GABA能中枢神经系统有关。2、短梗五加叶和短梗五加果的水提物及醇提物的镇静催眠活性及机制研究分别制备短梗五加叶的水提物(ASL-WE)和醇提物(ASL-AE)、短梗五加果的水提物(ASF-WE)和醇提物(ASF-AE)。采用与上一章相同的实验方法和实验条件,探究ASL-WE、ASL-AE、ASF-WE、ASF-AE的镇静催眠活性。结果显示,短梗五加叶和果提取物的镇静催眠作用不及刺五加叶和果的提取物显著,但是同样具有良好的镇静催眠活性,总体上镇静催眠活性强弱顺序依次是ASF-AE>ASF-WE>ASL-AE>ASL-WE,并且可能通过影响5-HT能和GABA能中枢神经系统产生催眠作用。
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