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目前癌症是受到全球关注的公共安全问题,严重危害人类健康。其中乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,虽然目前已在乳腺癌中发现多个肿瘤标记物,但诊断的灵敏度和特异性还有待提高。多梳蛋白家族(Polycomb group proteins,PcGs)是一类具有修饰组蛋白、抑制基因转录功能的蛋白家族,包含多梳抑制子复合体1(Polycomb repressive complex1,PRC1)和多梳抑制子复合体2(PRC2),在维持细胞身份识别标志、调节细胞分化、染色体结构维持、多能干细胞分化、细胞肿瘤性转化等方面发挥重要作用。环指蛋白2(Ring Finger protein 2,RNF2,Ring1b)作为PRC1复合体的催化亚基,具有E3连接酶活性,可催化组蛋白H2A的119位赖氨酸残基进行单泛素化(H2AK119Ub1),促进组蛋白降解,通过不同分子生物信号通路影响细胞增殖、肿瘤迁移、侵袭和细胞凋亡等生命活动,从而在肿瘤的发生发展过程中起到重要作用。目的:观察RNF2蛋白在乳腺癌和良性乳腺病变组织中的表达情况,并分析RNF2蛋白在乳腺癌组织的表达与患者临床病理特征间的联系;探讨RNF2蛋白表达对乳腺癌增殖、迁移和侵袭等方面的影响;探索RNF2蛋白对乳腺癌生物学行为的影响可能的机制。方法:1)采用免疫组织化学法检测112例乳腺癌和21例良性乳腺病变组织中的RNF2蛋白表达情况;2)应用QRT-PCR方法检测正常乳腺上皮细胞系和乳腺癌细胞系中的RNF2mRNA表达情况;3)在低表达RNF2蛋白的细胞系中转染过表达质粒,在高表达RNF2蛋白的细胞系中转染RNF2-si RNA以下调RNF2表达,通过MTT实验、克隆形成实验、Transwell实验观察相应处理后细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的变化;4)探讨RNF2蛋白对乳腺癌生物学行为影响的机制:免疫荧光双标,Western blot实验。结果:1)免疫组织化学结果证实RNF2蛋白在乳腺癌组织中表达水平高于良性乳腺病变组织(P<0.05);2)在乳腺癌组织中,RNF2阳性表达与肿瘤直径、淋巴结转移与否及TNM分期显著相关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤分级、ER、PR及HER-2表达情况无显著相关性(P>0.05);3)QRT-PCR方法结果显示:5株乳腺癌细胞系中RNF2 mRNA表达水平显著高于2株乳腺正常上皮细胞系(P<0.05);4)在MCF-7细胞中转染实验室制备的载体GFP和过表达RNF2-GFP质粒48 h,在MDA-MB-231细胞中转染NC(阴性对照)和RNF2-si RNA 48 h,进行MTT实验检测细胞1 d、2 d、3 d和4 d的增殖能力。结果显示,经转染RNF2-GFP后的MCF-7细胞,较转染GFP组,细胞活性逐渐增加(P<0.05);经转染RNF2-si RNA后的MDA-MB-231细胞,较对照组,细胞活性逐渐减弱(P<0.05);5)过表达RNF2蛋白后,MCF-7细胞的克隆形成数目多于对照组(P<0.05);相反,在沉默RNF2蛋白后,MDA-MB-231细胞的克隆形成数目明显减少(P<0.05);6)过表达RNF2蛋白后,穿过Transwell小室膜孔的MCF-7细胞增多,即细胞迁移能力和侵袭能力均显著增强(P<0.05)。在MDA-MB-231细胞中,沉默RNF2蛋白后,穿过小室膜孔的细胞明显减少,细胞迁移能力和侵袭能力均显著减弱(P<0.05)。7)免疫荧光双标和Western blot实验显示过表达RNF2蛋白后E-cadherin蛋白表达降低,下调RNF2蛋白后E-cadherin蛋白表达增强。结论:RNF2蛋白在乳腺癌的发生发展中起重要的促进作用,这一作用可能是通过下调E-cadherin蛋白介导的。