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本课题分别以1、14、28、42、56日龄仔猪和21日龄、28日龄、35日龄断奶仔猪为试验对象，以半定量RT-PCR法为检测手段，研究不同日龄仔猪抗菌肽PR-39、Protegrin-1和乳铁蛋白（Lactoferrin）基因表达的差异以及断奶日龄对仔猪抗菌肽PR-39、Protegrin-1和Lactoferrin基因表达的影响。 根据已报道的猪PR-39、Protegrin-1、Lactoferrin和内标β-actin基因序列，设计抗菌肽（蛋白）和β-actin的引物，分别以骨髓和十二指肠mRNA为模板，经反转录和PCR，克隆得到了相应的抗菌肽PR-39、Protegrin-1，乳铁蛋白Lactoferrin以及内标β-actin的基因片断。对测序结果进行序列分析表明，得到的PR-39、Protegrin-1、Lactoferrin和β-actin基因的序列与Genebank登陆的相应基因片断（登录号分别为L23825、X79868、M81327和BC067141）同源性分别为100％、99％、99％和91％。以抗菌肽（蛋白）和内标β-actin基因的成功克隆为基础，本试验探讨了PCR体系中适宜的退火温度、MgCl2浓度和循环次数，构建了适合于相应基因序列的优化半定量RT-PCR法，用于仔猪抗菌肽（蛋白）基因mRNA表达量的测定。 试验1：选取胎次相同、出生体重相近的1、14、28、42和56日龄杜长嘉小母猪各3头，屠宰后取骨髓和十二指肠组织分别用于检测仔猪抗菌肽PR-39、Protegrin-1和Lactoferrin基因在不同日龄时表达的差异；试验2：选取3窝胎次相同，出生体重相近的出生仔猪，分别在21日龄、28日龄和35日龄断奶。在断奶当天和断奶后一周各取3头仔猪，屠宰取骨髓和十二指肠组织，所取样品用于检测断奶日龄对抗菌肽和Lactoferrin基因表达的影响。 试验1结果表明，仔猪骨髓抗菌肽PR-39、Protegrin-1的表达量随着日龄的变化而发生变化，且两种抗菌肽表达量的变化趋势是一致的。在断奶前（1-28日龄）其表达量呈现逐渐增加趋势；在断奶后（28-42日龄）其表达量发生显著下降（P＜0.05）；其后（42-56日龄），抗菌肽的表达又有所回升；十二指肠中Lactoferrin基因的表达量中文摘要在仔猪出生时最高，其后随着日龄的增加，Lactofe州n表达量逐渐降低，56日龄时的表达量最低:此外，Lactofe币n基因的表达量在断奶后（28一42日龄）的降低水平尤其显著（p<0.05）。试验2结果表明，断奶对抗菌肤和乳铁蛋白基因的表达均产生显著的影响。不同断奶日龄的仔猪，在断奶后1周与断奶时相比，断奶均显著降低了抗菌肤和Lactoferrin基因的表达。21日龄断奶的仔猪，其PR一39、Protegrin-1和Lactofe州n基因的表达在28日龄比21日龄分别降低了38%，34%和77%（p<0.05）;28日龄断奶的仔猪，其PR一39、Proteghn一1和Lactofe币n基因的表达在35日龄比28日龄分别降低了46%，51%和53%（p<0.05）;35日龄断奶的仔猪，其pR一39、proteghn一1和Lactoferrin基因的表达在42日龄比35日龄分别降低了50%，49%和59%（p<0.05）。