农药高分辨质谱数据库的建立及应用研究

来源 :燕山大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:jacky1228
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通过对大量采集数据进行有效分析,从而实现对有害化学物质的筛查与识别,一直是食品安全与检测领域所面临的挑战。本论文利用高效液相色谱-高分辨四级杆飞行时间质谱(HPLC-QTOF-MS)建立了多种农药的精确质量数数据库和全扫描碰撞能量诱导裂解(CID)碎片离子高分辨参考质谱图数据库,并以此为基础建立了果蔬样品中农药化合物快速识别和多信息点予以确证的多残留快速筛查技术。通过选用两种高分辨飞行时间质谱及数据库管理软件,利用农药标准品参考物分别建立了包括427种农药化学品的ESI+模式MS~1精确质量数数据库和全扫描CIDMS~2碎片离子高分辨谱图库,同时对影响数据库应用的精确质量数准确度、色谱保留时间和碰撞能量等因素进行了分析,为非靶向农药残留物筛查奠定了方法基础,并利用不同质谱工作模式,建立了两种不以农药标准品为参考,而基于精确质量数数据库和全扫描碎片离子参考谱图库的果蔬样品中多农残快速筛查方法。方法一利用HPLC-QTOF-MS建立了基于MS~1识别和MS~2确证相结合的快速筛查方法。该方法中,每个样品需进行两次数据采集:首先利用HPLC-QTOF-MS的全质量数扫描模式,对样品中可能存在的农药残留进行一级精确质荷比扫描,并将采集数据与建立的MS~1精确质量数数据库进行比较,找出疑似阳性结果;然后利用HPLCQTOF-MS的目标二级扫描模式对疑似阳性结果进行CID碎片离子高分辨质谱扫描,与已建立的碎片离子高分辨参考谱图库进行比对,实现对结果的准确确证。本方法结合传统的SPE样品制备技术,以黄瓜和橙子两种实际样品为代表,通过优化检索参数,对其中317种农药进行了筛查方法验证,结果表明,其中266种农药(占83.9%)的筛查限SDLs≤10μg/kg,且在50μg/kg的添加水平下,假阴性率仅为4.7%,同时各农药的确证识别限(LOIs)≤10μg/kg的占77.6%,LOI s≤50μg/kg的占83.9%,满足日常农药残留检测的要求。方法二利用UHPLC-TripleTOFTM-MS基于人工智能碎片离子扫描方式,建立了仅需一次进样即可实现多种农药残留化合物的精确质荷比识别和高分辨碎片离子确证的快速筛查方法。方法采用信息关联采集(information dependent acquisition,IDA)模式,通过一次进样分析,实现全质荷比范围(100-1 000)内一级高分辨质谱采集和全扫描高分辨碎片离子质谱数据采集,通过与创建的包括1 700多张高分辨CID质谱图的数据库比对,实现可不依赖农药标准品参考物的快速筛查,并探讨了全扫描一级精确质荷比数据在目标化合物定量中的适用性。定性筛查方法验证结果表明,所有测试样品,对于数据库包括的427种农药,有93.2%(97.4%)的农药SDLs≤10μg/kg(50μg/kg),且其中84.8%的碎片离子可以通过与创建的参考谱图数据库进行比对而得以确证。定量方法验证结果表明,对于经常检出的106种农药,大部分农药线性范围为5-500μg/kg,在苹果,柑橘,番茄和菠菜四种基质中,10和100μg/kg两种添加水平下,回收率在80%-110%范围内的农药分别占88.7%和86.8%,全部添加样品回收率的相对标准偏差(RSD,n=12)小于20%的农药分别占94.3%(10μg/kg)和98.1%(100μg/kg),表明定量性能良好。经实际样品验证后,本论文利用已建立的两种筛查方法,对市售2 583个水果蔬菜样品进行了高通量多农药残留的筛查,在其中1 869个样品中检出农药残留结果5607个,并对筛查结果进行了分析。结果表明,本论文提出的筛查方法成本低廉,省时高效,是一种可用于日常大范围多类型农药残留监测的有力手段。
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