本文以罗布麻叶为研究对象,对罗布麻叶的有效成分及有害物质进行了含量分析,对罗布麻叶的指纹图谱进行了研究,并对不同生长期罗布麻叶有效物质的动态积累和变化规律进行了研究,为罗布麻叶药材的质量评价及其质量标准制订提供了可靠依据。主要研究内容与结果如下:1.罗布麻叶商品药材的鉴定研究。用传统鉴定方法及现代鉴定技术,从药材性状、显微特征、薄层色谱及HPLC指纹图谱等方面,建立罗布麻叶及其易混品大花罗布麻叶的鉴定方法;以有效成分定量分析结合指纹图谱整体分析的模式,评价商品罗布麻叶的品质。2.药典法测定醇溶性浸出物。根据罗布麻叶化学成分及其药理活性研究近况,按《中国药典》2005版一部附录规定的浸出物测定法,用冷浸法测定醇溶性浸出物,作为评价药材质量的手段之一。3.UV-VIS法测定罗布麻叶总黄酮的含量。选取金丝桃苷作对照品,以测定的金丝桃苷含量来作为罗布麻叶中总黄酮含量的计算指标,测定值与真实值有一定差异,本实验旨在对不同产地罗布麻叶中总黄酮的含量作量化比较,评价药材质量。4.HPLC法测定总槲皮素和四种黄酮类单体的含量。选取槲皮素作对照品,按照《中国药典》(2005年版)一部罗布麻叶总槲皮素含量项下,供试品制备用80%甲醇50mL,回流提取1小时,水解时盐酸量为提取液量的1/10。根据本实验供试品制备的优化结果,认为回流提取90min×3、提取液量∶盐酸量为9∶1最佳来测定总槲皮素的含量,从而为《中国药典》中罗布麻叶总槲皮素含量的修订提供了科学依据。选取罗布麻叶已知明确的四种黄酮类单体(槲皮素、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁)作对照品,采用HPLC法同时测定四种黄酮类单体的含量。此测定方法,准确可靠,灵敏度高,重现性良好,为罗布麻叶质量标准评价研究提供了科学依据。5.电感耦合等离子发射光谱法(ICP)和微波消解—原子荧光光谱法测定23种无机元素的含量(18种微量元素和5种重金属元素)。并用SPSS11.5对数据进行分析处理,获得了罗布麻叶无机元素含量的准确信息,可为罗布麻叶微量元素的药效药理研究提供科学依据,同时还将不同产地的微量元素制成元素分布图谱,可以进行罗布麻叶的真伪鉴别。6.毛细管气相色谱法对不同产地罗布麻叶中的农药残留量进行分析。检测结果初步表明,不同产区罗布麻叶中农药残留量有一定差异,罗布麻叶中农药残留量基本符合限量标准。7.建立了罗布麻叶高效液相色谱指纹图谱质控方法,可为罗布麻叶样品的质量和品种鉴定提供全面的信息和检测标准。不同产地及不同采收期罗布麻叶样品的HPLC指纹图谱结果表明,产地不同,罗布麻叶样品之间的相似度有一定的差异,这可能与罗布麻叶生长的不同地理条件,不同气候以及不同的品种有关,同一产地的罗布麻叶样品的高效液相指纹图谱有较好的相似度,实现对罗布麻叶药材质量的整体评价。8.建立了罗布麻叶毛细管电泳指纹图谱质控方法,可为罗布麻叶样品的质量和品种鉴定提供全面的信息和检测标准,实现对罗布麻叶药材质量的整体评价。9.GC-MS联用技术对不同产地罗布麻叶进行分析,测定其总离子流指纹图谱,确定共有峰,并对部分色谱峰进行了初步归属,初步建立了以14个共有峰为特征指纹信息的GC-MS指纹图谱,发现罗布麻叶样品之间的相似度有一定的差异。该方法准确可靠,重现性好,可作为罗布麻叶内在质量评价的依据。10.不同采收期罗布麻叶有效物质的动态积累及变化规律研究。用现代分析技术,以有效成分定量分析结合指纹图谱整体评价的模式,对不同生长时间罗布麻叶中黄酮类成分、挥发性成分、无机元素等有效物质的动态积累及变化规律进行分析研究,为确定药材的适宜采收期提供科学依据。11.气候因子对药材有效物质合成和积累的影响研究。考察气候因子(气温、光照时数、降水量、相对湿度等),以药材中有效物质黄酮类成分(总黄酮和槲皮素、芸香苷、异槲皮苷、金丝桃苷等)、挥发性成分、无机元素的累积量为考核指标,采用UV和HPLC、HPCE等对不同气候因子作用下药材有效物质的变化及其规律进行研究,用逐步回归法分析了气候因子对有效物质积累的影响,探讨气候因子与有效物质积累的相关性。论文主要创新点:1、探究不同物候期罗布麻叶有效物质的动态积累及变化规律,为确定罗布麻叶的最佳采收期提供依据;分析气候因子与有效物质积累的相关性,揭示影响有效物质含量主导因子,为优质药材的生产提供理论指导。2、以多种有效成分同时定量分析结合指纹图谱整体评价的模式,建立罗布麻叶品质和安全性的科学评价体系。3、首次建立罗布麻叶中芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷及槲皮素4种活性成分同时测定的HPLC-DAD、HPCE-DAD分析方法;对罗布麻叶中总槲皮素含量测定的实验条件作了优化,为《中国药典》2005年版一部中罗布麻叶总槲皮素含量测定的修订提供了科学依据。4、首次建立不同产地、不同采收期和不同种属罗布麻叶的HPCE-DAD、HSGC-MS指纹图谱分析方法。