一株产低温β-半乳糖苷酶菌株Microbacterium sp. LW106的筛选鉴定、产酶条件及其酶学特性

来源 :石河子大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:zhang760327
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目的:低温β-半乳糖苷酶在低温下具有较高的活性,在乳品加工中具有应用前景。筛选酶学特性能够满足低乳糖牛乳生产要求的高活性低温β-半乳糖苷酶仍是目前研究的热点。对天山中国一号冰川沉积物中分离的一株产低温β-半乳糖苷酶菌株的产酶条件和酶学特性进行研究。方法:以X-gal平板法初筛、测低温下粗酶液的相对酶活复筛,获得产低温-半乳糖苷酶的菌株。对目标菌株进行16S rRNA基因测序和系统发育分析,单因素实验研究该菌株产低温β-半乳糖苷酶的培养条件,硫酸铵分级沉淀初步纯化β-半乳糖苷酶并对其酶学特性进行分析。结论:1.根据形态观察、生理生化试验、16S rDNA基因序列同源性比对及构建系统发育树对该菌株进行了鉴定。结果显示,该菌株为微杆菌属(Microbacterium sp.),因此命名为Microbacterium LW106。2.该菌株最适产酶温度为25℃,最佳产酶碳源为可溶性淀粉,培养基初始pH 7.0,接种量为3%,装液量为30 mL/100 mL。在含可溶性淀粉、酵母粉和蛋白胨的培养基中培养42 h该菌株生长量达到最大,培养42 h胞内β-半乳糖苷酶活力达到最大值,为2.208±0.043 U/mL;3.对初步纯化的低温β-半乳糖苷酶酶学性质的研究表明,LW106所产β-半乳糖苷酶的最适pH为6.0,最适反应温度为35℃,4℃下相对酶活为78%,4℃和pH7.0时的稳定性最好,10 mmol/L的Na+对酶活性基本没有抑制作用,Ca2+对酶活性具有激活作用,达到对照的139%。菌株LW106所产低温β-半乳糖苷酶具有低温下较好的酶学性能,在乳品低温加工领域具有研究价值。
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