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视网膜母细胞瘤(RB)是儿童中最常见的原发性眼内恶性肿瘤。越来越多的证据表明在RB中微小RNA(miRNA)通过作用于致癌基因或肿瘤抑制基因来调节信号分子。因此,在我们的研究中,我们旨在通过靶向PAX6来研究miR-129-5p在RB细胞中PI3K/AKT信号传导途径的功能。在我们的研究中选择了两种RB细胞系Y79和WERI-Rb-1,然后通过转染miR-129-5p抑制剂或si-PAX6来探索miR-129-5p在RB细胞增殖,侵袭和迁移的调节作用。双荧光素酶测定分析用于检测miR-129-5p和PAX6之间的靶向关系。此外,Western印迹分析用于检测细胞周期相关因子(CDK2和细胞周期蛋白E)和PI3K/AKT信号通路相关因子(p-AKT和AKT)的表达。裸鼠肿瘤发生实验用于评估miR-129a-5p对体内RB生长的影响。miR-129-5p在RB细胞系中下调。miR-129-5p直接靶向PAX6的3’-非翻译区。人工下调miR-129-5p促进RB细胞系Y79和WERI-Rb-1的细胞增殖、迁移和侵袭,并通过PI3K/AKT信号通路促进体内RB生长,可通过转染沉默的PAX6进行逆转。本研究提供的证据表明,过表达miR-129-5p通过PI3K/AKT信号通路直接靶向PAX6,可抑制视网膜母细胞瘤恶化,这为更好地治疗RB提供了分子基础。在探讨静脉注射泛素化含PHD和环脂结构域蛋白1(UHRF1)对视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖和凋亡的影响,并阐明UHRF1基因在RB发展过程中的分子机制。选择人RB WERI-Rb-1细胞并分配到空白组(没有转染的WERI-Rb-1细胞),NC-shRNA组(用NC-shRNA病毒感染的WERI-Rb-1细胞)和UHRF1-shRNA组(用pGC-UHRF1-shRNA-LV-GFP#(39-1)病毒感染的WERI-Rb-1细胞)。通过RT-qPCR和Western印迹分析检测UHRF1的mRNA和蛋白质表达。通过MTT测定、EdU测定、流式细胞术和Hoechst染色评估UHRF1沉默对WERI-Rb-1细胞增殖和凋亡的影响。此外,通过Western印迹分析测量细胞周期相关因子(细胞周期蛋白D1)、凋亡相关因子(caspase-9,Bcl-2和Bax)和PI3K/Akt信号通路相关因子(p-PI3K,PI3K,p-Akt and Akt)的表达。成功构建了RNA干扰质粒UHRF1-shRNA。在用UHRF1-shRNA感染WERI-Rb-1细胞后,发现UHRF1的mRNA和蛋白质表达降低。用UHRF1-shRNA感染的WERI-Rb-1细胞显示出增殖能力受抑制和细胞凋亡增加。在UHRF1-shRNA组中,多数细胞在G0/G1期停滞,少数细胞在S期和G2/M期停滞。用UHRF1-shRNA感染的WERI-Rb-1细胞增加了caspase-9和Bax的表达,降低了Bcl-2的表达,降低了p-PI3K和p-Akt的水平。总之,我们的研究表明,沉默UHRF1可以抑制RB细胞的增殖并促进细胞凋亡。该机制可能是由于Bcl-2/Bax表达比例下调和通过PI3K/Akt信号通路促进caspase-9表达引起的。