结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区耐药结核杆菌临床分离株耐药性的相关性研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxuhhe
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目的:通过比较分析不同耐药性的结核分枝杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因表达水平的差异,探讨研究结核分枝杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。  方法:以新疆地区广泛流行的耐药结核分枝杆菌临床分离株为研究对象,分别提取结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核分枝杆菌临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的结核分枝杆菌临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素的结核分枝杆菌临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的结核分枝杆菌临床分离株(EB-MTB)、耐多药的结核分枝杆菌临床分离株的结核分枝杆菌菌株(MDR)的总RNA,并进行纯度鉴定。运用SYBR Green I实时荧光定量PCR的方法,分别检测各组结核分枝杆菌菌株原始状态下的PhoP基因和PhoR基因的表达,比较分析不同耐药性的结核分枝杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因表达水平的差异。检测比较分析各组结核分枝杆菌在INH、RFP、SM、EB抗结核药物选择压力下,各组结核分枝杆菌菌株的PhoP基因和PhoR基因表达的变化;检测比较分析各组结核分枝杆菌在复制的感染小鼠动物模型的肺脏、肝脏和脾脏内,各组结核分枝杆菌菌株的PhoP基因和PhoR基因表达的变化。  结果:⑴在原始状态下,耐药性结核分枝杆菌临床分离株的PhoP基因和PhoR基因的mRNA表达水平比临床分离药物敏感菌株显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);⑵在抗结核药物(INH、RFP、SM、EB)选择压力作用下,结核分枝杆菌PhoP基因和PhoR基因的mRNA表达水平均较各组结核分枝杆菌在原始状态下表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05);⑶在各组结核分枝杆菌感染小鼠动物模型的肺脏、肝脏和脾脏内,各组耐药结核分枝杆菌临床分离株的PhoP基因和PhoR基因的mRNA表达水平比各组结核分枝杆菌在原始状态下显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。  结论:①结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、EB-MTB和MDR中,结核分枝杆菌PhoP和PhoR基因的表达有差异;②在抗结核药物(INH、RFP、SM、EB)选择压力作用下,各组耐药结核分枝杆菌临床分离株的PhoP基因和PhoR基因的mRNA表达水平比各组结核分枝杆菌在原始状态下显著升高;③在各组结核分枝杆菌感染小鼠动物模型的肺脏、肝脏和脾脏内,各组耐药结核分枝杆菌临床分离株的PhoP基因和PhoR基因的mRNA表达水平比各组结核分枝杆菌在原始状态下显著升高;综上所述:结核分枝杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核分枝杆菌的耐药性具有相关性。
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