菜蛾盘绒茧蜂毒液对寄主小菜蛾生理调控机制的研究

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本文对菜蛾盘绒茧蜂Cotesia plutellae毒液的性质和功能及其在寄主小菜蛾Plutella xylostella体内的发育进行了研究,结果总结如下: 一、菜蛾盘绒茧蜂毒液蛋白成分的电泳分析 菜蛾盘绒茧蜂每个毒囊的蛋白含量平均为0.169μg。对提取的毒液粗提液进行SDS-PAGE,电泳结果表明,该毒液含有20种多肽,分布范围为7.98-301.61kDa,分别为301.61、183.18、134.65、112.31、82.34、70.46、63.76、60.62、46.11、45.06、42.27、31.93、27.73、26.36、24.23、21.78、15.27、12.89、10.21和7.98 kDa,其中分子量为82.34、45.06、27.73、26.36、24.23和10.21kDa的蛋白含量较高。 二、菜蛾盘绒茧蜂毒液中酶的组成及其发育动态 酶化学方法测定结果表明菜蛾盘绒茧蜂毒液具有碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酯酶和海藻糖酶的活性,其中碱性磷酸酶自羽化后一直保持一稳定的活性,酸性磷酸酶和海藻糖酶的活性自羽化后开始增强,两天后达到最高,而后活性一直下降,而酯酶活性自羽化后一直降低,到羽化后6d降到最低,随后开始回升。 三、菜蛾盘绒茧蜂毒液/萼液对寄主小菜蛾幼虫离体血细胞形态和存活的影响 对寄主小菜蛾幼虫血细胞的离体培养结果显示,在离体培养的前期,菜蛾盘绒茧蜂毒液对浆血细胞的延展具有明显的抑制作用,而且随着毒液浓度的增加抑制效果越明显。但离体培养4h发现,原先被抑制的浆血细胞恢复了延展的能力,大部分血细胞都正常延展。而颗粒血细胞从一开始就能延展,其形态不受毒液的影响。但与毒液共培养后,浆血细胞和颗粒血细胞的存活率都有所降低。在0.04VRE/μl的浓度下培养4小时后,浆血细胞的存活率从对照的93.69%降到了74.13%,而颗粒血细胞的死亡率也从对照的5.85%增加到了16.35%。 同样,菜蛾盘绒茧蜂萼液对寄主幼虫血细胞的延展具有显著的抑制作用,而且浓度越高效果越显著。培养4h后,大量的血细胞被损坏,而且浓度越大,损坏的程度越大。在0.01FE/μl的浓度下,许多血细胞的质膜破裂。在0.04FE/μl浓度下的颗粒血细胞被严重损坏,而浆血细胞也出现了破碎和溶解的症状,甚至有些浆血细胞只剩下细胞核可见。另外,在细胞培养介质中出现了大量的细胞碎片。而且各个处理下的浆血细胞和颗粒血细胞的存活率也都降到了40%以内。
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