目的：半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白即胱抑素C (Cystatin C, Cys C),其血清浓度测定是替代传统的血尿素和肌酐(Cr)测定的首选肾功能评价指标。近年来,数据显示CysC是心脏病终点事件(发病率、死亡率、心衰等)的早期危险标志物,与左室重塑及心功能障碍有高度相关性,尤其在老年人群及高血压病人群。基于盐敏感大鼠的试验结果显示在心肌肥厚期CysC及Cats的mRNA及蛋白表达均升高。心衰期Cats表达继续升高,而CysC的表达降低或相对降低。以上数据显示CysC不仅是慢性心衰的标志物,而且可能在高血压病左室重塑中有重要作用。本实验通过腺病毒介导转染的CysC基因在SHR大鼠心肌中过表达,探索CysC与Cat K在SHR大鼠心肌的表达对左室重塑和心功能的影响。方法：1、实验动物和设计选择32周龄自发性高血压大鼠(SHR)63只,随机分为CysC腺病毒转染高表达组、空载体对照组、空白对照组。同龄Wistar大鼠21只作阴性参照。分批于腺病毒转染前0天,注射后2天及4周处死大鼠。测量鼠尾动脉血压,称体重、左室质量,计算左室质量指数(LVMI=左室重量／体重)。留取心尖(约1／2左心室)锡箔纸包裹后液氮冷冻,-80℃冰箱保存备用于qRT-PCR。余1／2左室组织经4％中性多聚甲醛液固定48小时后石蜡包埋备用于免疫组织化学染色。2、病毒转染大鼠麻醉后,剃除胸部毛发,PHILIPS公司IE33超声仪,S12-5超声探头引导,取左室短轴心底及心尖切面,应用26G针头分别于左室前壁及侧壁共注射5.36X 1010pf u/ml的Ad-CC或Ad-GFP100ul,对照组注射等量PBS。3、超声心动图测量PHILIPS公司IE33心脏超声仪,选S12-5超声探头,频率5MHz,测量左室乳头肌水平左室舒张末内径(LVEDD)、左室短轴缩短分数(LVFS)及左室射血分数(LVEF)以评价心脏结构及功能。4、实时定量多聚酶链反应(qRT-PCR)Trizol法提取总RNA,然后逆转录mRNA至cDNA,经Primer5.0设计CysC特异引物,β-actin为内参照,荧光定量PCR检测CysC的mRNA相对表达。5、免疫组织化学染色取组织切片,进行CysC及CatK免疫组织化学染色,每只实验动物选取5张切片,随机分析3个视野,图像采用IPP6.0软件分析,取其平均累积光密度(IOD),半定量分析蛋白表达。6、Masson染色切片常规脱蜡至蒸馏水,Masson复合染液及亮绿染液染色,梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片。显微镜观察,并采集图像。IPP6.0软件分析,选取3个无血管视野测定胶原纤维在每个视野中所占比率,最后取均数代表总胶原容积评分(CVF)=胶原面积／总面积。7、统计学处理各项观察指标以均数±标准差((?)±S)表示,单因素方差分析。利用统计学软件SPSS 13.0进行统计学处理,P<0.05表示有差异。结果：1、实验过程中3只SHR大鼠死亡,高表达组2只,空载体组1只,最终60只完成实验。其中高表达组19只,空载体组20只,对照组21只。2、与对照组比较,CysC在高表达组转染后2天表达最高(P<0.001),4周后表达仍高(P<0.05)。空载体组表达无明显变化。免疫组织化学染色显示CysC蛋白表达同样变化。SHR各组CatK较W组表达均增高,组间无差异。未干预各组CysC较W组降低(P<0.05)。3、CysC高表达组大鼠LVMI、LVEDD及LVFS较对照组有差异(P<0.05)。CVF也增高,但无统计学意义(P=0.076)。空载体组较对照组无差别。与W组比较,SHR各组大鼠LVMI、LVEDD及LVFS均有明显差异(P<0.01)。结论：1、超声引导心肌局部注射成功实现腺病毒介导的CysC心肌局部高表达,减少实验大鼠的死亡率。2、慢性心衰期SHR大鼠心肌CysC表达下调,CatK表达上调,提示Cats及其抑制物CysC平衡与心功能具有相关性。3、CysC心肌局部高表达可能抑制SHR慢性心衰期左室重塑及心功能衰退进展。