急性心肌梗死对心室肌细胞离子通道活性的影响

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目的:急性心肌梗死后可发生各种心律失常,特别是室性心律失常,是急性心肌梗死早期最严重的并发症之一,也是发生心源性猝死的主要原因。急性心肌梗死后梗死区内部及梗死周边区尚存活的心肌,往往在心律失常的发生上起关键作用。本课题旨在研究急性心肌梗死后梗死区心肌细胞钠通道电流(INa)、L型钙通道电流(ICa-L)、瞬间外向钾电流(Ito)和内向整流性钾电流(IKI)活性的变化,探讨急性心肌梗死发生心律失常的离子机制。 材料与方法: 1实验动物:新西兰大耳白兔50只,体重1.5~2kg。38只兔用于建立急性心肌梗死动物模型,2只兔作为假手术对照组;另外10只兔作为正常对照组。采用开胸结扎免冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型,单笼饲养1周(梗死后1周组,19只兔)或2月(梗死后2月组,19只兔)后备用。假手术对照组(2只兔)开胸后仅分离冠状动脉左前降支,并不结扎血管。 2细胞分离:利用酶解(胶原酶,Sigma公司)的方法分离心室肌细胞,梗死组细胞来源于心脏冠状动脉左前降支毗邻的左心室前壁梗死区部位,正常对照组细胞则取自正常兔心室与梗死区相对应的部位。 3电流记录:应用膜片钳全细胞记录方法,记录急 中文摘要性。0肌梗死后1周及2月心外膜梗死区心肌细胞IN沪l。L、Ip和IM活性的变化,并与正常对照组进行比较分析。电流记录的刺激程序由 pulse+pn1Sefit软件控制,通道信号经EPC刁膜片钳放大器放大,通过Ag个 电极丝和填充电极内液的微电极导入细胞,产生的电流信号经EPC个转换,为pulse + pulsefi上软件采集、分析。 结果: l b。:①梗死后1周组、2月组与对照组相比,电流-电压关系曲线uV曲线)上移。但IN。电压依赖性不变,对激活电位、峰值电位、反转电位及卜V曲线的形态轨迹均无影响。均在60mV激活,30mV达峰值,+40mV时反转。I。电流密度峰值卜30mV)的比较显示:对照组为45.5士5.33P朋F(n=12 cells),梗死后1周组为22.48士4*ZPA/PF(n=14cells),较对照组显著下降,P<0*1;梗死后 2月组下降更居,为 16.4土4人3PA/PF(n=13 eelN,与对照组及梗死后1周组相比,显著下降,P刃.01。②梗死后1周组、梗死后2月组与对照组相比,失活曲线明显左移伯向超级化方向移动),以梗死后1周组左移更加明显。对照组半数失活电压(V。*为刁6.2土 5.3mV(n=5cells),梗死后 1周组V。s为七9.l士5石mV(n=6 cells),与对照组比较相差显著,P刃.05。梗死后2月组V。。为七4.3士 5.7mV*二7 cells),与对照组比较无显著差异,P功刀5。③梗死后1周组1川灭活后恢复时程较对照组明显减慢。梗死后二月组与对照组相比无明显差别。④假手术组与正常对照组相比,IV曲线的形态轨迹相同,其IN。电流密度峰值u4二士 41 PA/PF,n=7 cells),与正常对 2 中文摘要 照组(45.5士5.33 PA/PF, n=12 cells)相比,无明显差别, P>0.05。INS失活曲线及INS灭活后恢复曲线的对比也显示, 两组无明显差别。 2!。L:①梗死后1周组、2月组与对照组相比,I-V 曲线上移。但Ie。电压依赖性不变,对激活电位、峰值 电位、反转电位及IN曲线的形态轨迹均无影响。均在 30mV激活,OLV达峰值,巧0mV时反转。IC。卜电流密 度峰值(omV)的比较显示:对照组为5.5 8上1.53PA/PF (n=10 cells),梗死后 1周组为 3.52士0.93 PMF(n=6 cells\较对照组显著下降,P<o.05;梗死后2月组为4.84 土 1人SPA/PF(11mpll C*lS),较对照组下降,较梗死后 1周 组增高,但均无统计学差异,P叩.05。②梗死后1周组、 梗死后2月组与对照组相比,失活曲线明显左移吃向超 级化方向移动),以梗死后1周组左移更加明显。对照组 VO。为1*士 4.ZmV(n=8 cells),梗死后 1周组为乙25.9 士7.omV,n=6 ceus),与对照组比较相差显著,P<o.05。 梗死后 2月组 V。j为2.3士 5石(n=8 cells),与对照组比 较无显著差异,P>0仍。 3 儿:3组细胞I;。的I-V曲线,均呈线性电压依赖 性。对照组细胞在习0mV激活,梗死后1周组、梗死后2 月组细胞在毛0mV激活,与对照组相比,这2组细胞I刁 曲线明显下移。Ip电流密度(+60In时)的对比显示: 对照组为 17.39土5.24P栅F(n=16 cells),梗死后 1周组 为 7.47士2.39 PNF(lr=12 cells),与对照组相比,显著 下降,P<0.of。梗死后2月组为11.82士4.11 PNF(一11 CClls),与对照组相比,显著下降,P功.of;但与梗死后 1
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