论文部分内容阅读
沙门氏菌是肠杆菌科中威胁畜禽产品安全的重要病原菌之一,WHO已将其列为具有严重危害和中等危害的食物传播性病原。动物生前以及后续的屠宰加工、运输、贮藏和销售等环节都容易污染和传播沙门氏菌。养殖业中大量使用抗生素使得动物性食品极易成为耐药细菌的“蓄水池”,相关研究表明近年来沙门氏菌对抗生素的耐药性在稳定的增长,同时,其抗药性有通过食物链转移给人体病原菌甚至益生菌的潜在危险。因此,对沙门氏菌、特别是耐药沙门氏菌在肉品生产链中的分布和传播情况进行研究,对确保食品安全和公共卫生有重要的意义。本试验对从四川省重点地区大型养殖场、下游屠宰场和肉类市场收集到的165株沙门氏菌在鉴定的基础上进行了血清型分析、耐药性分析和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型研究。1.肉品生产链中沙门氏菌的分离和鉴定2010年至2011年从猪肉、鸡肉、鸭肉生产链(养殖场-屠宰场-销售市场)中共采集育肥畜禽粪便样和生肉样1382份,采用沙门氏菌科玛嘉显色培养基分离出疑似沙门氏菌,并应用针对沙门氏菌invA和hut基因的二重PCR方法对疑似沙门氏菌进行鉴定,对其阳性菌株再进行血清分型。结果：共有165份样品中检出沙门氏菌,污染率为11.94%(165/1382),各生产链(猪肉、鸡肉、鸭肉)沙门氏菌污染率分别为13.51%(112/829)、6.94%(30/432)、19.01%(23/121)；165株沙门氏菌共检出14种血清型,以德尔卑(S.derby)、鼠伤寒(S. typhimurium)、波茨坦(S.potsdam)、吉韦(S.give)等沙门氏菌为主,所占比例分别为46.06%、9.70%、5.45%、3.64%。四川省主要肉品生产链中沙门氏菌的污染情况比较严重,猪肉生产链主要表现为优势血清型自上游生产链向下游生产链水平传播的趋势,鸡肉生产链和鸭肉生产链表现为下游生产链外源性污染严重。2.肉品生产链中沙门氏菌的耐药性分析参照WHO推荐的肉汤微量稀释法对165株沙门氏菌进行10种抗生素(组合)药敏试验,参考CLSI标准(2010)对药敏结果进行判定。结果：猪肉生产链中沙门氏菌对四环素耐药率最高(89.29%),对大观霉素、甲氧苄啶/磺胺甲噁畔、萘啶酸和氨苄西林耐药率较高,对头孢噻呋不耐药,多重耐药率为48.21%,共有19种耐药谱,从上游环节到下游环节菌株对大部分药物的耐药率有下降趋势；鸡肉沙门氏菌对大观霉素、四环素、萘啶酸、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药率较高,均在45%以上,多重耐药率达66.67%,共有15种耐药谱；鸭肉生产链中沙门氏菌对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、萘啶酸、四环素、大观霉素和氨苄西林的耐药率较高,分别为73.91%、69.57%、52.17%、39.13%和34.78%,对环丙沙星、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、氟苯尼考和庆大霉素的耐药率较低,均在20%以下,多重耐药率为73.91%,共有14种耐药谱,从上游环节到下游环节菌株对大部分药物的耐药率有上升趋势。3.沙门氏菌的PFGE分型分析按不同的菌株来源、血清型和耐药谱选取沙门氏菌,参照美国CDC标准进行PFGE分型,结果：97株沙门氏菌的PFGE基因型相似性在40%～100%之间；来自猪肉生产链的74株沙门氏菌有34个PFGE谱型,存在沙门氏菌沿生产链水平传播的现象；来自市场鸡肉中的15株沙门氏菌有12个PFGE谱型,鸭肉生产链中的8株沙门氏菌有7个PFGE谱型,两者PFGE谱型复杂,但鸭肉生产链中也存在沙门氏菌沿生产链水平传播的现象。本研究分析了肉品生产链中沙门氏菌的污染和耐药情况,为监测沙门氏菌的污染率和耐药性提供了基础数据；对肉品生产链中的沙门氏菌进行PFGE分型,为研究沙门氏菌在食品链中的传播机制奠定了基础。论文研究结果具有一定的理论意义和实际应用价值。