探究慢病毒介导BMP-2及VEGF-165转染山羊BMSCs向成骨方向分化的影响

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目的:探究慢病毒介导骨形态发生蛋白2(Bone Morphogenetic protein 2,BMP-2)及血管内皮生长因子165(Vascular endothelial growth factor 165)转染山羊骨髓间充质干细胞(Goat bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨方向分化的影响;方法:采用全骨髓贴壁法培养原代山羊的骨髓间充质干细胞,传代后在慢病毒的介导下导入目的基因,研究山羊BMSCs作为基因共转移靶细胞的可行性,以及细胞的体外培养条件、增殖情况,转染后向成骨方向分化等生物学变化。结果:BMP-2 mRNA的表达与BMP-2组无明显差异(P>0.05),VEGF-165mRNA的表达与VEGF-165组无明显差异(P>0.05);Lv-BMP2-VEGF165转染组OCN mRN A的表达高于单基因转染组(P<0.05);BMP2和VEGF165蛋白只有在Lv-BMP2-VEGF165组中高效率表达;Lv-BMP2-VEGF165组OCN蛋白的表达显著高于其他各组(p<0.01),Lv-BMP2-VEGF165转染组碱性磷酸酶活性明显高于其他组。结论:BMP2、VEGF165、BMP2/VEGF-165可成功转入到山羊骨髓间充质干细胞内,并能长期稳定表达,在新骨形成过程中,二者的协同作用能通过促进碱性磷酸酶(Alkalin e phosphatase)的生成、骨钙素(Osteocalcin)的合成并使细胞向成骨方向发展。
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