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目的:制备龙血竭羟丙基-β-环糊精包合物(HP-β-CD)温敏凝胶,并对其进行体外评价建立质量标准草案,考察其对实验大鼠宫颈柱状上皮异位模型的影响。方法:(1)采用HPLC法测定龙血竭药材、龙血竭HP-β-CD、龙血竭HP-β-CD温敏凝胶中龙血素A、B的含量。(2)采用水溶液搅拌法制备包合物,以包合率和包合物收率为评价指标,结合正交试验法,以包合时间、包合温度及主客分子质量比为影响因素,优选龙血竭HP-β-CD的制备工艺,通过紫外扫描(UV)、差示扫描量热法(DSC)、薄层色谱法(TLC)以及水溶性对包合物进行鉴定和评价。(3)采用冷溶法制备龙血竭HP-β-CD包合物温敏凝胶,以试管倒置法测定胶凝温度及胶凝时间,以胶凝温度和胶凝时间为评价指标,筛选基质种类及用量,优选龙血竭HP-β-CD温敏凝胶的制备工艺,并进行小试工艺的验证。(4)采用TLC法对龙血竭HP-β-CD温敏凝胶中的龙血竭进行鉴别,采用HPLC法测定其中龙血素A、B的量,并对其胶凝温度、胶凝时间、粘度、pH值、密度、体外释放度进行考察。(5)以Eckstein刺激性评价标准为指标,进行龙血竭HP-β-CD包合物温敏凝胶对大鼠阴道刺激性的考察;采用阴道灌洗法对龙血竭HP-β-CD包合物温敏凝胶在大鼠阴道内滞留时间进行考察;对宫颈柱状上皮异位大鼠动物模型的建立方法进行考察;以阴道外观、阴道病理形态学、子宫组织切片图和子宫解剖图为综合指标,考察龙血竭HP-β-CD包合物温敏凝胶对宫颈柱状上皮异位大鼠动物模型的影响。结果:(1)龙血素A、B在275nm处均有最大吸收;线性关系考察中,龙血素A、B的峰面积均与进样量有良好的线性关系,其线性范围分别为16.5~198.0μg/ml、15.0~180.0μg/ml,回归方程分别为y_a=18.335x-13.171(r=0.99915)、y_b=15.662x-9.1581(r=0.99915),三种供试品龙血素A、B的回收率均合格(龙血竭药材为99.2%,99.0%;龙血竭HP-β-CD为100.9%,100.2%;龙血竭HP-β-CD温敏凝胶为100.7%,101.9%)。(2)龙血竭HP-β-CD包合物制备的最佳条件:包合时间2h,包合温度40℃,龙血竭与HP-β-CD质量比为1:10,紫外扫描、差示扫描量热法的结果均得出龙血竭与HP-β-CD形成了包合物,且水溶性显著高于龙血竭药材的水溶性。(3)龙血竭HP-β-CD温敏凝胶最佳成型条件:32%P407、4%P188和0.2%HPMC加适量水,搅匀,于4℃条件下放置24h使溶胀,搅拌使溶解,加入40%包合物,搅拌均匀,再加入0.05%尼伯金乙酯,5%甘油,搅匀,于105℃下杀菌30min,即得;小试工艺稳定,重复性好。(4)所得温敏凝胶液均匀细腻,为深红棕色;龙血素A、B的平均含量分别为0.241mg/g和0.253mg/g;TLC法可鉴别出龙血竭;胶凝温度稳定在34±1.0℃范围内;胶凝时间为93~111s;胶凝后粘度均在20000mPa?s以上;pH值为4.48~4.57;密度为1.1195~1.1267mg/g;以水为释放介质,4h时体外释放为81.4%~89.8%。(5)龙血竭HP-β-CD温敏凝胶对大鼠阴道的刺激性评价结果与生理盐水相似;在大鼠阴道内的滞留时间大于4h;14天后,中剂量组(0.2ml/只/天)对宫颈柱状上皮异位大鼠动物模型的治疗结果评分(评分越低,疗效越好)远低于模型组和阳性对照组。结论:所建立的龙血素A、B分析方法准确可靠;龙血竭HP-β-CD包合物及其温敏凝胶的制备工艺稳定可靠,重复性好;体外评价中建立了质量标准草案;对宫颈柱状上皮异位大鼠动物模型有治疗效果,中剂量(0.2ml/只/天)时治疗效果最佳。