改变人工内淋巴液钾离子浓度对不同来源人间充质干细胞生存能力影响的体外研究

来源 :北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luckychuan
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研究目的:本研究通过将不同组织来源的人间充质干细胞在不同浓度钾离子(K+)人工内淋巴液中进行体外培养,比较不同组织来源的人间充质干细胞在人工内淋巴液中生存能力的差别,并探索最适宜间充质干细胞生存的内淋巴液K+浓度。  研究方法:为了比较不同来源的人间充质干细胞在人工内淋巴液中生存能力的差别,从人脂肪、骨髓、胎盘和脐带等4种不同组织中提取了间充质干细胞,并对其进行表型和分化能力鉴定。用MTS细胞增殖实验方法检测4种间充质干细胞在不同K+浓度(5~153.8mM)的人工内淋巴液中增殖能力的区别。经AnnexinⅤ-FITC/PI双染法观察4种间充质干细胞在不同K+浓度的人工内淋巴液中细胞凋亡率的差别。Caspase-3活性法检测4种间充质干细胞在人工内淋巴液中的凋亡是否与caspase-3凋亡通路相关。Elisa法探索间充质干细胞在人工内淋巴的生物学行为是否与炎症因子相关。最后,透射电镜下观察间充质干细胞在不同K+浓度的人工内淋巴液体外培养后,其亚细胞超微结构的改变。  研究结果:脂肪、骨髓、胎盘、脐带来源的4种人间充质干细胞均可表达特征性的表面抗原,并均有成脂成骨分化能力。4种不同来源的间充质干细胞在人工内淋巴液中增殖、凋亡等生物学行为无明显差别。当改变人工内淋巴液K+浓度至相对高(55mM~130mM)时,间充质干细胞凋亡率较正常对照组相比无明显增高。间充质干细胞在不同浓度K+的人工内淋巴液中体外培养时,增殖能力均受抑制。间充质干细胞在相对高K+浓度(55mM~130mM)的人工内淋巴液中体外培养时,细胞质内可产生大量糖原颗粒。不同浓度K+人工内淋巴液组对间充质干细胞IL-2,IL-6,IL-10和TNF-α的分泌无明显影响,初步认为其生物学行为的改变与炎症反应无显著相关性。  研究结论:不同组织来源的间充质干细胞在人工内淋巴液中的生存能力无明显差别。而改变人工内淋巴液中K+至相对高浓度时,即55~130mM,可显著提高间充质干细胞的体外生存能力;但不同浓度K+人工内淋巴液均抑制间充质干细胞的增殖。
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