有机小分子荧光探针的设计合成及性质研究

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随着生物医学技术的发展及现代医学的迫切需求,荧光检测技术由于其成本低廉、实时检测、操作简单等优点而被广泛应用。同时,响应型荧光探针因其对检测底物的专一性和高灵敏性受到科研工作者越来越多的关注。水合肼作为一种重要的化工原料,在防腐、纺织染料、制药、感光化学品、乳化剂等化工行业被大量应用。但由于肼是一种毒性很强的物质,不仅对环境有很大的污染隐患,对人体也有很强的毒害作用。因此,本论文以萘为荧光团合成了一例特异性检测肼的荧光探针Naphpsulf-O,探针分子本身无荧光,通过与肼发生化学反应可实现对肼的“关-开”型检测。探针Naphpsulf-O对肼检测的灵敏度高,检测性可达22 nmol/L。此外,探针对胼的响应速度快,有利于对肼的实时监测。更重要的是,探针可实现在活细胞内对肼定量荧光成像,这将为研究肼对细胞的毒害作用提供有力工具。该探针具有很好化学和生物学应用前景。因此能够简捷、准确、原位地检测化合物肼对于生命科学、疾病诊断及环境科学具有重要的潜在价值。细胞内活性硫物种(RSS)是一个通用术语的含硫生物分子,是生物体内重要的成分,在生命活动过程中具有特殊的生理功能,也是研究病理过程的重要物质。细胞内活性硫物种(RSS)例如半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy)、谷胱甘肽(GSH)在人体生理过程中发挥巨大的作用。因此,研究开发具有高效、灵敏的活性硫物种探针对研究细胞生理和病理过程具有十分重要的意义。本论文基于激发态分子内的电子转移机理,拟选用喹唑啉酮的衍生物(CHCQ)为荧光团,丙烯酸为识别位点,成功设计合成了一种高选择性的新型半胱氨酸(Cys)荧光探针。在体外模拟生理条件下,检测探针对Cys的响应情况、对Cys的响应时间、探针的PH稳定性及对Cys的特异性。并考察探针在活细胞中检测Cys的性能。此外,CHCQ-Ac探针具有良好的溶解性、低细胞毒性、良好的细胞膜通透性。CHCQ-Ac探针与半胱氨酸反应后释放的CHCQ荧光团不溶于水,能够产生不溶性荧光聚合物,提供强烈的荧光。因此,CHCQ-Ac探针可以提供一个新颖的、快速响应、高灵敏度的半胱氨酸检测方法。
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