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小金海棠(Malus xiaojinensis)是中国学者发现的第一个抗缺铁苹果树种，是极其重要的苹果种质资源，本文以小金海棠为试材，克隆了转录因子MxbZIP10上游启动子，并对该启动子进行了生物信息学分析，主要研究结果如下:
1)根据MxbZIP10序列在NCBI中查找高度同源序列，通过PCR方法克隆MxbZIP10上游启动子，PCR上下游引物分别为GCTATCCACAAACTCCTAAA、AACATATAGACTCTCTCCGC，最终成功克隆到MxbZIP10上游启动子1489bp。
2)利用CTAB法提取小金海棠DNA，并分别用分光光度法和凝胶电泳对DNA进行检测，结果显示小金海棠DNA在波长为260nm处吸光度值为0.012，而在280nm处吸光度值为0.006，260nm/280nm值为2，小金海棠DNA浓度为120μg/mL。以小金海棠DNA为模板，通过PCR程序扩增，得到一条约为1500bp的条带，将目的条带DNA回收。回收得到的DNA片段克隆到pGEM-T载体，并转化到已经制备好的超级感受态中进行蓝白筛选。挑阳性克隆培养后提取质粒，T-proMxbZIP10命名。测序结果表明，小金海棠MxbZIP10上游启动子包含1489bp碱基序列。
3)采用软件plantCARE对MxbZIP10上游启动子进行在线分析，该启动子序列中含有核心元件17个TATA-box和12个CAAT-box。另外还包括响应ABA的功能元件ABRE1个、响应逆境的功能元件HSE1个、LTR1以及响应光的功能元件G-box5个等作用元件。
综上，小金海棠作为一种重要的铁营养果树资源，研究其吸收铁机制为果树等农作物种植提供基础依据，同时为解决作物生长发育提供理论基础，MxbZIP10上游启动子为研究MxbZIP10表达调控机制提供了重要基础，具有十分重要的意义。
1)根据MxbZIP10序列在NCBI中查找高度同源序列，通过PCR方法克隆MxbZIP10上游启动子，PCR上下游引物分别为GCTATCCACAAACTCCTAAA、AACATATAGACTCTCTCCGC，最终成功克隆到MxbZIP10上游启动子1489bp。
2)利用CTAB法提取小金海棠DNA，并分别用分光光度法和凝胶电泳对DNA进行检测，结果显示小金海棠DNA在波长为260nm处吸光度值为0.012，而在280nm处吸光度值为0.006，260nm/280nm值为2，小金海棠DNA浓度为120μg/mL。以小金海棠DNA为模板，通过PCR程序扩增，得到一条约为1500bp的条带，将目的条带DNA回收。回收得到的DNA片段克隆到pGEM-T载体，并转化到已经制备好的超级感受态中进行蓝白筛选。挑阳性克隆培养后提取质粒，T-proMxbZIP10命名。测序结果表明，小金海棠MxbZIP10上游启动子包含1489bp碱基序列。
3)采用软件plantCARE对MxbZIP10上游启动子进行在线分析，该启动子序列中含有核心元件17个TATA-box和12个CAAT-box。另外还包括响应ABA的功能元件ABRE1个、响应逆境的功能元件HSE1个、LTR1以及响应光的功能元件G-box5个等作用元件。
综上，小金海棠作为一种重要的铁营养果树资源，研究其吸收铁机制为果树等农作物种植提供基础依据，同时为解决作物生长发育提供理论基础，MxbZIP10上游启动子为研究MxbZIP10表达调控机制提供了重要基础，具有十分重要的意义。