目的:本课题旨在探究临床上抗真菌药物的使用与光滑念珠菌耐药性产生的关联,并分析转录因子PDR1的功能获得性(gain-of-function,GOF)突变对菌株唑类耐药性及对上皮细胞黏附能力的影响,同时阐明转录因子Pdr1对下游基因EPA1的调控作用。方法:收集4位患者用药前、后配对的光滑念珠菌临床菌株共8株,采用肉汤稀释法检测菌株的药物敏感性,使用PCR技术扩增PDR1基因并对其序列进行分析,利用实时荧光定量PCR技术检测外排泵基因的表达水平,利用同源重组方法敲除目的基因,除此之外还构建了相应分子克隆以及进行了上皮细胞黏附试验。结果:4株唑类敏感的菌株在经过抗真菌治疗后其PDR1基因均出现了GOF突变,从而获得了对氟康唑的耐药性,4株耐药菌株GOF突变分别为G1099D、G346D、L344S和P927S;药物外排泵基因CDR1和CDR2的表达上调是造成菌株耐药的最重要原因;不同的PDR1 GOF突变会引起不同的耐药相关基因表达谱;PDR1的G1099D和P927S突变会引起菌株对上皮细胞黏附能力增强,但该现象与菌株背景相关;Epa1是介导菌株黏附的重要黏附素;Pdr1对EPA1基因具有直接调控作用。结论:抗真菌药物的使用会诱导菌株耐药性的产生;转录因子PDR1的GOF突变可介导菌株唑类耐药及细胞黏附能力增强,是菌株生存力及致病力的重要进化过程。