咳喘宁胶囊对慢性支气管炎大鼠氧化损伤治疗作用机理的实验研究

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目的:慢性支气管炎(以下简称“慢支”)是呼吸系统的常见病、多发病。在其发病过程中,存在典型的氧化损伤现象。“咳喘宁胶囊治疗慢支实验与临床研究”课题组成员根据慢支形成的主要病因病机,总结导师数十年临床经验,筛选有效药物研制成咳喘宁胶囊。本研究旨在通过对慢支大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标的检测分析,探讨氧化—抗氧化失衡与慢支发病的关系,并进一步分析咳喘宁胶囊对慢支的治疗作用机理。 方法:实验前1周将40只SD大鼠置于室温为11℃~17℃的实验环境中喂养,随机分为正常对照组(以下简称“正常组”)、模型对照组(以下简称“模型组”)、咳喘宁胶囊低剂量组(以下简称“咳低组”)、咳喘宁胶囊高剂量组(以下简称“咳高组”)、桂龙咳喘宁胶囊对照组(以下简称“桂龙组”,阳性对照药)共5组,每组8只,雌雄各半。造模各组参照《医学动物实验方法》,采用改良烟熏法复制慢支动物模型。将造模各组共32只大鼠置于特制的1m~3的烟室中,用刨花、锯末、烟叶各50g点燃熏烟,每日2次,每次30分钟,持续30天。正常组则 中文摘要置于正常无烟环境中饲养。5组均于造模结束后第2天起连续灌胃生理盐水或药物ZI 天。正常组:灌胃生理盐水10ml巾g,每日1次:模型组:灌胃生理盐水10ml巾g,每日1次:咳低组:每日用药剂量O.ggi呛讨当于临床成人用药量的14.1倍),以0.09giml的了悬液,每日1次灌胃;咳高组:每日用药剂量1.sgikg叮当于临床成人用药量的兆.2倍,以队1阿二l的混悬液,每日1次灌胃:桂龙组:每日用药剂量 0.gg/kg叮当于临床成人用药量的14.1倍),以0.09旮ml的混 悬液,每日1次灌 胃。f疗灌药结束后第 2大,断头取血,立即以 3500f/min离。L’ smin,取血清,一 20 C冻疗待检。取左侧肺脏中部组织 0.SCm X0.scm,用 10%甲醛溶液固定,组织切片用 HE染色,光镜下观察肺与支气管的组织形态变化;将左侧剩余肺组织用冰牛理盐水冲洗,滤纸吸湿后,称取湿重0.3g A右,加入预) 的牛理盐水,川 Iii动匀浆x制成 10‘测 01卜今l织匀浆,。1℃6000r/min岛心 smin,捉取I一A液,一20℃冻斤待检。取右侧0树1[织汀支’酯帅5 了 沉(8*L),川丫理盐水沉去表而血渍,门】个C生理盐水反复灌沈41次,每次灌洗量为 41ml,丁1收量>909,1”C 1500Vmin ig心 smin,提耿且清液,-20*冻 行待检。 实验采J!I硫代L比妥酸(TBA)比色分析沾测定SD大鼠血清、肺刽纤及SALF中**A含量的变化:采川贞阐冷氧化酶法 汕定SD大鼠血清、o组织及***F中SOD脑性的变化;采川可见光法测定SD大鼠血消、肺组织及***F中**T活忖的变化:采用比色分析沾测定SO人鼠血清、帅针匀及 BALF小 GSH和 GSH-PX活件的变化。 中文摘要 通过与桂龙咳喘宁胶囊作对照,观察高、低剂量咳喘宁胶 囊对慢支大鼠血清、肺组织及BALF中 MDA含量和 SOD、 C肌、GSH、GSH干X活性的影响,从抗氧化损伤角度, 探讨咳喘宁胶囊对慢支的治疗作用机理。 结果:①咳喘宁胶囊对慢支大鼠血清、肺组织及BALF 中MDA含量的影响:结果显示,模型组大鼠血清、肺组 织及BALF中MDA含量门 次为3.63士O.3O,1.23土 0.07,4.28士0.Is)均较正常组(依次 为2.61士0.2。1,0.76 士0.07,3.33士0.29 ) 明显升高(Pwto.01);经治 疗用 药,治疗各组MDA含量均低于模型组(Papo.05或Pwt 0.01):咳高组*OA 含量(依次为2.661*39,O.* 士 0.07,3.36士0.L19)均低 于佳龙组(依次为 3.15士0.32, 0.95士0.17,3.80士0.33)与咳 * 组(皙 次为3.15士0.36, 0.97士0.24,3.84士0.、13)(Pwto.05 或 Pwto.01),而 桂龙组与咳低组之问未见明显差异(P nnO.0引c②咳喘 宁胶囊对慢支人鼠巾俏、ollJ到纤及BALF小SOD活件的影 响:结果显示,模型纵大鼠血清、肺组织及BALF中SOD 活件(依次为 289.8。1土 15.gS,5.00士 0。11,20.18士2.11) 均较J卜常纠(依次为 382.66土 29.21,6。11士 0.ZS,3。1.06 士3.N)u显降低(P<O.01):经治 疗门药,治疗计组SOD 活‘仕均高于模型组(Pwto.05或P ttO.OI);咳高刽SOD 活性(依夕为376.23士28.41,6.36士0.34,33.69土3.13) 均高于桂龙组(依次为319.66士20.36,5。10土0.27,29.12 i3.02)与咳低 乡(依次为 320.48士20.66,5.sl士0.25, 28.55土3.06)(*<0.01),而桂龙组与咳 低乡之间 未见 明显差异(P>0.05)。③咳喘宁胶囊对慢支大
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