研究目的:建立检测抗人Ig E、抗人FcεRⅠ自身抗体的间接ELISA法,分析以上两种自身抗体及其他肥大细胞活化相关分子在慢性荨麻疹(CU)及炎症性肠病(IBD)中的表达水平及临床意义。研究方法:(1)以奥马珠单抗为标准品、人Ig E为捕获抗原、HRP-抗人Ig G为检测抗体,建立抗人Ig E定量间接ELISA法。以重组人FcεRⅠα为捕获抗原、HRP-抗人Ig G为检测抗体,建立抗人FcεRⅠ自身抗体的定性间接ELISA法。分别对所建方法进行条件优化、性能评估。(2)收集43例CU患者、111例克罗恩(CD)患者、62例溃疡性结肠炎(UC)患者及年龄性别匹配的健康对照(HC)人群的血清样本及临床资料。(3)使用自建间接ELISA法检测CU患者血清抗Ig E、抗FcεRⅠ水平以验证方法的正确性,采用免疫比浊法、ELISA法分别检测CU患者血清Ig E、s FcεRⅠ水平,分析四种分子的相关性及对CU的诊断意义。(4)采用ELISA测定IBD患者血清Ig E、抗Ig E、抗FcεRⅠ水平,采用间接免疫荧光法检测血清抗核抗体(ANA)、抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)、抗小肠杯状细胞抗体(GAB)、抗胰腺腺泡抗体(PAB)及抗酿酒酵母菌抗体(ASCA)。评价各指标单独或联合检测的诊断效能及与临床特征的相关性。研究结果:(1)成功建立抗Ig E定量ELISA法,该方法特异性、抗干扰能力较好,定量限=2.0μg/m L,批内及批间重复性实验CV<10%,回收试验回收率80～110%;成功建立抗FcεRⅠ自身抗体半定量ELISA法,批内及批间重复性实验CV<10%,灵敏度>1:4800,满足临床应用的基本要求。(2)新建方法处理血清样本时体现出良好的工作性能,实验发现CU患者血清Ig E、抗Ig E、抗FcεRⅠ水平显著高于HC组(P<0.001),s FcεRⅠα亦有上升趋势,但无统计学意义(P>0.05)。Ig E、抗Ig E、抗FcεRⅠ对CU的诊断性能相近(AUC=0.72)。(3)IBD患者血清总Ig E呈上升趋势,但与HC相比差异无统计学意义(P=0.072>0.05)。抗FcεRⅠ在CD、UC中显著升高(P<0.001),而CD、UC、HC组抗Ig E水平无显著性差异,P=0.170>0.05。抗FcεRI阳性克罗恩病患者具有更高的疾病活动度,OR:1.312(1.085,1.588),P=0.005。抗FcεRI、ANA、ANCA、ASCA的联合检测可高IBD诊断效能,AUC=0.908(0.870～0.947)。结论:成功建立了抗Ig E、抗FcεRⅠ的间接ELISA法,为肥大细胞相关分子的检测及研究供了可行的手段。CU患者血清Ig E、抗Ig E及抗FcεRⅠ水平较健康对照显著升高。抗Ig E、抗FcεRⅠ联合IBD相关自身抗体可更好地分析疾病自身免疫因素。肥大细胞活化相关分子具有成为CU、IBD诊断指标的潜能。