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目的:火针作为中医特色疗法在治疗神经病理性疼痛方面具有一定的优势,带状疱疹后神经痛（Postherpetic neuralgia,PHN）是神经病理性疼痛的一种,临床中多采用综合疗法,我院针灸科形成了以火针为主治疗PHN的临床特色。本研究通过回顾性研究分析临床病例中火针为主疗法治疗PHN的临床疗效,结合患者的基线资料分析PHN的发病特点和影响因素。并通过动物实验观察火针对PHN模型大鼠的疼痛行为学、背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）中cAMP、PKA、TRPV1蛋白的影响,验证火针治疗PHN的疗效,初步探讨火针的镇痛机制;基于cAMP/PKA通路使用其抑制剂H-89和激动剂8-Br-cAMP明确火针是否通过该通路发挥镇痛作用,分析PKA抑制剂和激动剂对痛觉过敏的影响,探讨火针疗法可能存在的优势。方法:本研究分为临床回顾性研究和动物实验两部分。在临床回顾性研究中,筛选并收集整理2017年12月至2019年12月就诊于广州中医药大学第一附属医院病房的PHN患者姓名、年龄、性别、发病节气、现病史、既往病史、受累神经、中医证型、疼痛分级、VAS评分等数据信息,将病例随机分为火针为主治疗组和药物综合治疗组,采用EXCEL表格对相关数据进行整理归纳,用SPSS21.0软件统计,采用Wilcoxon符号秩检验分析PHN患者治疗前后VAS评分差异,通过Man-Whitney u检验、卡方检验或Fisher精确概率法分析患者年龄、性别、季节、疼痛程度、疼痛区域等因素在不同年龄段的差异,由单因素、多因素logistic回归分析探讨PHN发病的影响因素。动物实验分为两部分:（1）将40只SD大鼠随机分为空白组（Control）、造模组（RTX）、溶剂组（Solvent）、火针组（FA）、加巴喷丁组（GBP,n=8）。采用树脂毒素（RTX）诱导PHN大鼠模型,观察大鼠行为学数据,大鼠出现热、痛分离现象标志造模成功。造模成功后,相应各组进行火针、药物干预,造模前3天及造模后每隔1日检测大鼠机械刺激阈值（Mechanical Pain Threshold,PWT）和热刺激阈值（Thermal withdrawal latency,TWL）。实验结束后检测大鼠背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）中环腺苷酸（cAMP）、蛋白激酶A（PKA）、香草酸瞬时受体亚型（TRPV1）蛋白表达情况,观察火针治疗PHN大鼠的疗效,初步探讨火针的镇痛机制。使用Grapad prism 8.0软件画图,SPSS21.0软件统计,行为学数据采用两因素重复测量方差分析和Sidak’s检验,WB蛋白灰度值采用单因素方差分析法（One-way ANOVA）进行比较,以P<0.05为差异有统计学意义。（2）将48只SD大鼠随机分为空白组、造模组、溶剂组、抑制剂组（RTX+H-89）、抑制剂+火针组（RTX+H-89+FA）、激动剂+火针组（RTX+8-Br+FA,n=8）,造模前3天开展行为学检测以确保RTX造模成功,造模后每隔1日对大鼠PWT和TWL进行行为学检测。使用cAMP/PKA通路的抑制剂（H-89）、激动剂（8-Br）分别联合火针进行干预,抑制剂和激动剂分别在实验早期（第5d、7d、9d）和实验晚期（第19d、21d、23d）使用,中间为单纯火针干预期。干预疗程结束后,大鼠DRG取材,结合大鼠行为学数据观察DRG中cAMP、PKA、TRPV1蛋白表达变化。基于cAMP/PKA通路使用其抑制剂H-89和激动剂8-Br明确火针是否通过该通路发挥镇痛作用,同时通过不同时间点的干预因素,分析PKA抑制剂和激动剂对PHN疼痛的影响;结合实验一,分析火针疗法的治疗优势。结果:1.回顾性研究（1）80例研究对象中,PHN住院患者多是60岁以上的老年患者,占总人数的72.5%,且PHN患病人数随年龄增长呈现逐步升高趋势,这与既往文献资料相一致;PHN患者男女比例1:1,各年龄段中性别差异无统计学意义（P>0.05）。PHN秋冬季节发病人数明显多于春夏季节,占59%;按照传统节气划分,夏至1人,冬至最多7人,不同季节PHN发病人数差异有统计学意义（P<0.05）。（2）中医证型分析,湿热证、肝经实证分别有39例（48.75%）,21例（26.25%）,不同证型PHN发病人数差异有统计学意义（P<0.05）。PHN住院患者入院时中度疼痛23例（28.75%）、重度疼痛54例（67.5%）;疼痛性质划分,疼痛为刺痛的患者20例,占比25%;灼痛19例,占比23.75%;疼痛分布区域最多为肋间神经区,三叉神经区、颈神经区次之;不同年龄段疼痛性质、疼痛程度及疼痛区域差异无统计学意义（P>0.05）。（3）两种不同治疗方案火针为主和药物综合疗法在治疗前后VAS评分相比,差异有统计学意义（P<0.05）;火针为主的治疗方案在降低VAS评分上优势更明显,两组相比存在统计学差异（P<0.05）。（4）单因素Logistic回归分析显示:年龄、性别、入院时VAS疼痛评分、疼痛区域、季节、节气、中医证型、是否有高血压、冠心病、糖尿病、血脂异常、肿瘤、高尿酸、手术病史等情况不具有统计学意义（P>0.05）;多因素Logistic回归分析显示:性别、入院时VAS疼痛评分、疼痛区域、季节、节气、证型、是否有高血压、冠心病、糖尿病、血脂异常、肿瘤、高尿酸、手术等病史对主要观察指标VAS无显著影响;年龄因素是PHN发病的的危险因素（P<0.05,OR>1）。2.实验一结果如下:（1）RTX造模实验第6d,RTX组PWT值（10.41±0.76）,下降超过基线均值（22.00±2.20）的50%（P<0.01）;TWL值（16.73±1.46）明显高于基线水平（11.87±1.04）（P<0.01）,差异有统计学意义;大鼠出现热、痛分离趋势,提示RTX成功诱发PHN模型。（2）不同干预措施对大鼠PWT的影响实验第6d,FA、GBP组PWT值开始呈现上升趋势,实验第23d达到最大值。实验第8d,FA组干预PWT值为（11.51±0.70）,显著高于RTX组（9.86±0.76）（P<0.01）,差异有统计学意义。第8d,GBP组PWT值为（12.03±1.34）,显著高于RTX组（P<0.01）,差异有统计学意义。FA、GBP组两组PWT值相比（P>0.05）,差异无统计学意义。（3）不同干预措施对大鼠TWL的影响实验第8 d,FA、GBP组TWL值开始呈现下降趋势。实验第12 d,FA组干预TWL值为（15.64±0.70）,显著低于RTX组（18.19±1.64）（P<0.05）,差异有统计学意义。实验第10 d,GBP组干预TWL值为（15.04±0.70）,显著低于RTX组（P<0.01）,差异有统计学意义,GBP组与FA组TWL值（16.77±0.72）相比（P<0.01）,差异有统计学意义。第23 d开始,FA组TWL值（13.93±1.61）明显低于GBP组（14.56±0.42）,与Control组（12.57±1.46）相比（P>0.05）,差异无统计学意义。（4）各组大鼠DRG中cAMP、PKA、TRPV1蛋白表达RTX组与Control、Solvent组相比,DRG中cAMP、PKA、TRPV1蛋白表达均显著降低,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;FA、GBP组与RTX组相比,DRG中cAMP、PKA、TRPV1蛋白表达均显著上升,差异有统计学意义（P<0.05）;FA组与GBP组相比,FA组TRPV1蛋白明显高于GBP组,（P<0.05）,差异有统计学意义;两组cAMP、PKA蛋白表达相比,差异无统计学意义（P>0.05）。3.实验二结果如下:（1）进一步验证了实验一的造模结果,证明了RTX能够成功诱发PHN大鼠模型。（2）PKA抑制剂H-89改善了PHN大鼠的机械痛敏状态,降低了TWL阈值水平,同时抑制了DRG中cAMP、PKA、TRPV1的蛋白表达;H-89+FA组抑制剂使用期间（实验早期、晚期）,与火针协同发挥镇痛作用,加快了机械刺激阈值回归基线水平,提高了cAMP、PKA、TRPV1的蛋白表达水平。（3）cAMP激动剂8-Br降低了PHN大鼠的PWT值,升高了TWL阈值,扩大了PHN大鼠的热痛分离趋势,加重了PHN症状,8-Br+FA组与H-89+FA组相比,cAMP、PKA、TRPV1的蛋白表达明显下降（P<0.01）,差异有统计学意义。8-Br+FA组在实验中期（单纯火针干预期间）,火针发挥了有效的治疗作用,改善了机械痛敏,降低了TWL阈值水平;与实验一中火针对TWL作用相吻合。（4）实验第21d,H-89+FA组TWL值与Slovent组相比差异无统计学意义,P>0.05,H-89组与Slovent组相比（P<0.01）,差异有统计学意义;第23d,H-89+FA组与Control组相比差异无统计学意义（P>0.05）,H-89组与Slovent组相比,P<0.01差异有统计学意义。结论:综上所述,回顾性分析显示火针为主疗法在改善中重度PHN患者VAS评分方面具有明显的优势,PHN患者的发病人数随年龄升高而增加;PHN发病可能与季节、节气因素相关。性别、入院时VAS疼痛评分、疼痛区域、中医证型、是否有高血压、冠心病、手术病史等因素与PHN发病的相关性不具有统计学意义;年龄因素是PHN发病的的危险因素（P<0.05,OR>1）。动物实验表明RTX造模后PWT和TWL分别呈下降和上升趋势,出现热痛分离现象,这与PHN的临床表现极为相似,证明RTX能成功诱发PHN模型。火针干预后,PHN大鼠DRG中cAMP、PKA、TRPV1蛋白表达均明显上升,PWT阈值上升,改善了机械痛敏的状态;TWL值下降,恢复了位于C类神经纤维上TRPV1（温度感受器和热伤害感受器）的蛋白表达,热痛分离趋势得到改善。cAMP/PKA通路抑制剂和激动剂的使用验证了该信号通路参与了PHN疼痛发生发展过程,是火针发挥镇痛作用的重要通路之一。同时发现PKA抑制剂H-89对机械痛敏和热阈值的上升均有抑制作用,H-89的这一作用,可能成为治疗PHN药物研究的新方向。火针、H-89、加巴喷丁在改善机械痛方面的镇痛效果接近,但在PHN发展后期,火针对热痛调控作用明显优于加巴喷丁和H-89,火针组的TRPV1蛋白表达也明显高于药物组。火针具有“以热引热、火郁发之”的作用,其对热痛的调控优势可能与其高温作用有关。