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目的TNBC型乳腺癌是指ER、PR、Her2均为阴性的乳腺癌,约占所有类型乳腺癌的15-20%。近年来,随着特定靶点药物的发展,其他类型乳腺癌患者预后得到巨大改善。但TNBC往往发病年龄早,易发生内脏转移,更具侵袭性,因其缺乏有效治疗靶点,预后极差。寻找判断预后的生物学标志物和新的治疗靶点是TNBC研究的热点和难点。最近多项研究发现,肿瘤微环境中的TILs在TNBC的发生发展中起了重要作用,不同的TILs亚群,发挥着截然不同的作用,寻找特殊淋巴细胞亚群,对该亚群及其分泌的细胞因子进行深入研究,可能会寻找到与TNBC预后相关的新的生物学标志物和治疗靶点。Th22细胞是新近发现的一类CD4+T淋巴细胞亚群,以高水平分泌IL-22,但并不分泌IFN-y、IL-4和IL-17为特点。Th22细胞的主要效应细胞因子是IL-22,其生物学功能通过IL-22实现。IL-22在多种肿瘤中发挥着差要的作用,IL-22与其他细胞因子不同之处的关键在于其虽然来源于免疫细胞,但却作用于非造血上皮细胞,提示IL-22可能是上皮细胞-免疫细胞之间相互作用的关键因子。本实验拟研究Th22细胞及其分泌细胞因子IL-22在TNBC患者中的作用及机制。方法流式细胞仪及ELISA法检测TNBC患者体内Th22及其分泌细胞因子IL-22的表达水平,分析IL-22表达水平与TNBC患者临床病理学特征和预后的关系,明确其是否可以作为判断预后的生物学标志物;MTT法检测IL-22对TNBC细胞增殖的作用;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验明确IL-22对TNBC细胞迁移的作用;流式细胞仪检测IL-22在紫杉醇诱导TNBC细胞凋亡中的作用,研究其和紫杉醇耐药的关系;Western Blot法检测JAK-STAT3、ERK、p38和AKT的磷酸化水平,阐明IL-22在TNBC中的作用机制。结果(1)Th22细胞在TNBC肿瘤组织中较正常乳腺组织中显著增高(p<0.001),TNBC患者血清IL-22水平也较良性乳腺疾病患者显著升高,且IL-22水平和TNM分期相关,期患者较Ⅰ、Ⅱ期患者,体内IL-22水平显著升高(p<0.001)。根据TNBC患者体内IL-22水平将其分为IL-22高表达组(IL-22水平>320pg/ml)及IL-22低表达组(IL-22水平≤320pg/ml),通过临床病理学特征分析,高表达组更易发生淋巴结转移,组织学分级更高。通过长期随访发现高表达IL-22患者较低表达IL-22患者无病生存时间显著缩短(p<0.05)。(2)通过MTT实验,发现IL-22促进TNBC细胞增殖,随着IL-22浓度增高,促进作用显著增强(p<0.001)。(3)通过划痕愈合实验及Transwell小室迁移实验,发现BL-22促进TNBC细胞迁移,随着IL-22浓度增高,促进作用显著增强(p<0.001)。(4)通过流式细胞仪凋亡检测,IL-22可以抑制紫杉醇诱导的TNBC细胞凋亡,随着IL-22浓度增高,抑制凋亡作用显著增强(p<0.05)。(5)通过 Western Blot 法,发现 IL-22 可以活化 JAK-STAT3、ERK、p38 和AKT信号通路,随着IL-22浓度增高,磷酸化作用更显著。结论综上所述,Th22细胞和其分泌的细胞因子IL-22和TNBC的发生发展相关。TNBC 患者体内高水平IL-22提示预后不良,IL-22可能通过激活JAK-STAT3/MAPKs/AKT信号通路促进TNBC细胞增殖和迁移,并可抑制紫杉醇诱导的凋亡。IL-22未来可能成为TNBC患者治疗疗效和预后的预测因子,并有望成为新的治疗靶点。