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赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是由各种曲霉属和青霉属等真菌产生的次生代谢产物,广泛存在于谷物和食品中,对人类和动物都有很大的危害。核酸适配体是通过指数富集的配体进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)经体外筛选得到的单链寡核苷酸(ssDNA或RNA),它们可通过自身形成特定复杂的空间三维结构以高亲和力和特异性结合靶标分子。本研究通过改良的氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)的SELEX筛选方法,获得OTA的核苷酸适配体,结合GO淬灭荧光和胶体金分光光度法技术,构建了两种基于适配体识别OTA的快速灵敏的检测方法。首先,基于GO吸附单链寡核苷酸ssDNA的原理,采用免固定化的GO-SELEX方法筛选OTA毒素适配体。经过10轮筛选获得适配体富集文库,经克隆测序后得到23条适配体候选序列,经一级、二级结构,亲和性和特异性分析,得到一条特异识别OTA毒素的最佳适配体Seq.14,其解离常数为138.9±4.9 nmol/L。其次,基于羧基荧光素(FAM)标记的适配体与GO之间的荧光共振能量转移(FRET)技术,构建了一种荧光传感器。当无OTA存在时,FAM标记的适配体被GO吸附并淬灭其荧光信号;当有OTA存在时,适配体与OTA结合,从GO上脱落,引起荧光的重新恢复。在最优条件下,OTA毒素浓度在20～3000nmol/L之间与荧光强度呈线性相关性(R2=0.995),检测限为21.8nmol/L,加标回收率范围在96.0～119.7%之间,相对标准偏差为3.8%。该方法可用于红酒样品中OTA毒素的检测。最后,基于核酸适配体对靶标的特异性和胶体金分光光度法的灵敏性,建立了一种简单快速检测OTA的方法。利用核酸适配体能够抑制胶体金在高盐溶液中的聚集,当OTA存在时,其与适配体特异性结合,使胶体金发生聚集,胶体金的颜色发生变化。在最优的条件下,吸光度的比值(A656nm/A520nm)与OTA浓度在0～300 ng/mL的范围内呈良好的线性关系,其线性回归方程为y=0.001x+0.2264,线性相关系数R2为0.9962,加标回收率为99.2～103.1%,相对标准偏差为4.4%。该方法稳定性和重复性较好,可作为OTA的快速检测方法。