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葡萄霜霉病是世界上最严重的卵菌病害之一,每年都需使用大量化学农药进行防治。为了避免化学农药带来的环境和健康等诸多方面的问题,筛选出可应用田间的生物防治资源,本研究以葡萄叶提取物与娄地青霉为研究对象,探究不同葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉游动孢子释放、萌发和游动性的影响;采用显微观察和叶片点接法测定巨峰葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉孢子囊和游动孢子的抑制作用以及对葡萄霜霉病的防治效果,并应用液质联用技术对葡萄叶提取物组成成分进行分析;试验从七种蓝纹奶酪中共分离到四株青霉,测定四株青霉的孢子悬浮液和无菌发酵液对葡萄生单轴霉的抑制作用和对葡萄霜霉病的室内外的防治效果,并对有效菌株进行鉴定。本研究主要结果如下: 不同品种的葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉游动孢子均有显著的抑制作用且新老叶之间差异较小。抗病品种巨峰叶片提取物在浓度为5 mg/mL时对游动孢子释放和萌发的抑制率都能达90%,并能使游动孢子失去游动性;感病品种红乳叶片提取物在浓度为10 mg/mL以上时才能达到上述效果;感病品种美人指叶片提取物在浓度为5mg/mL时对游动孢子萌发的抑制率可达90%,在浓度为10 mg/mL时才对游动孢子的释放和游动性具有强烈的抑制作用。 葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉孢子囊和游动孢子的萌发均有明显的抑制作用,当使用浓度为10 mg/mL时,葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉孢子囊和游动孢子的萌发抑制率都在85%以上。荧光显微观察发现,葡萄叶提取物可以抑制葡萄生单轴霉在叶片内的扩展,在10 mg/mL浓度下,葡萄叶提取物能显著抑制孢子囊的形成,其抑制率为82.4%。室内防治试验显示,防治效果随施用浓度的提高而增加,在50 mg/mL浓度下,葡萄叶提取物的防治效果可达100%。在田间防治试验中,葡萄叶提取物对葡萄霜霉病具有良好的预防效果与化学药剂不存在显著差异,发病后的防治效果达63.2%。经液质联用技术检测,葡萄叶提取物成分复杂,共含有33种物质,且主要为芪类化合物,如白藜芦醇、紫檀芪、蛇葡萄素和葡萄素,其中白藜芦醇和紫檀芪均表现出对葡萄生单轴霉强烈的抑制效果,紫檀芪的抑制作用强于白藜芦醇。 菌株P3的孢子悬浮液对葡萄生单轴霉孢子囊萌发的抑制作用显著好于其余菌株,萌发率仅为18%,同时其室内防效达92%。经摇床培养法,四株青霉的无菌发酵液与对照相比均可显著抑制孢子囊的萌发,且不存在显著差异。采用静置培养法,菌株P2和P3的无菌发酵液对孢子囊的抑制作用最好,且与摇床培养不存在显著差异;菌株P1和P4的无菌发酵液对孢子囊的抑制作用较差。室内防治试验表明:四株青霉的无菌发酵液只有菌株P3的发酵液可完全阻止葡萄霜霉病的发生,其余菌株发酵液均有霜霉病发生,且发病率均在85%以上与对照不存在显著差异。田间试验表明,菌株P3的孢子悬浮液和无菌发酵液均可预防葡萄霜霉病的发生并对病害的防治效果达85%以上,与化学药剂不存在显著差异。经形态学和分子鉴定菌株P3为娄地青霉(Penicillium roqueforti)。其无菌发酵液经乙酸乙酯提取后,经液质联用分析,初步鉴定其抑菌活性成分含有mycophenolic acid和andrastin A两种物质。