南酸枣皮黄酮类化合物的提取、纯化及其功能性研究

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本文以南酸枣皮为研究对象,对南酸枣皮中的黄酮类化合物进行提取、分离纯化、抑菌活性和抗氧化活性研究。主要研究内容及实验结果如下:1.通过单因素实验分别考察乙醇体积分数、提取时间、提取温度、料液比对南酸枣皮黄酮提取得率的影响,确定各因素的适宜水平。在单因素试验的基础上,通过响应面分析法,得到南酸枣皮黄酮的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数60%、提取温度65℃、提取时间1.6h、料液比1:25(g/mL),在此条件下,南酸枣皮总黄酮的得率为9.72%。2.通过树脂的静态吸附实验、静态解吸实验及吸附动力学研究,比较了HP2MGL、LSA-10、AB-8、D101、NKA-9和DA-201六种大孔吸附树脂对南酸枣皮黄酮的分离纯化效果,发现HP2MGL树脂能较好地分离、纯化南酸枣皮提取液中的总黄酮,在上述实验基础上进一步研究和优化了HP2MGL大孔吸附树脂分离纯化南酸枣皮中总黄酮的工艺条件。实验结果表明,树脂HP2MGL的吸附率和解吸率分别为57.29%、96.72%,对南酸枣皮黄酮类化合物的分离纯化效果较好,其纯化的最佳工艺条件为:南酸枣皮黄酮类化合物样液初始浓度为1.30mg/mL,洗脱剂为体积分数50%的乙醇水溶液,洗脱液料比为30:1(50%乙醇溶液:大孔吸附树脂,mL/g),上样流速1mL/min,沈脱流速1mL/min。经HP2MGL大孔树脂纯化后,南酸枣皮黄酮类化合物的纯度从未纯化前的16.21%提高到76.73%,提高了的3.73倍。3.实验选取了单核增生李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、阪崎肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、宋内氏志贺氏菌和金黄色葡萄球菌六种常见的食源性致病菌,用经过大孔吸附树脂HP2MGL富集处理后的南酸枣皮黄酮类化合物进行体外抑菌实验,测定了南酸枣皮黄酮类化合物对六种菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度和最低致死浓度。结果表明,南酸枣皮黄酮类化合物的提取液具有较强的抑菌效果,对革兰氏阳性菌的抑制较其他几种革兰氏阴性菌的效果更好;对金黄色葡萄球菌和单核增生李斯特菌的抑菌作用较强,其最低抑菌浓度(MIC)和最低致死浓度(MBC)分别为5mg/mL、10mg/mL。4.通过测定南酸枣皮黄酮类化合物提取液对DPPH自由基的清除能力、总抗氧化能力、铁离子还原能力的实验来评估其抗氧化能力,结果显示南酸枣皮黄酮类化合物提取液具有较强的抗氧化性。
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