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目的 了解土拉弗氏菌病人免疫力的维持时间、影响因素及一般人群中隐性感染的情况;建立套式PCR-EIA检测鉴定技术,用于土拉弗氏菌的快速检测鉴定。 方法 分别于发病后3周(1986年1月)、6个月(1986年7月)、2年(1987年)、3年(1988年)、6年(1991年)、7年(1992年)、8年(1993年)、9年(1994年)、20年(2005年),对原胶南县外贸冷藏厂的31名土拉弗氏菌病人及同地区一般人群进行纵向队列研究,采用胶体金法检测血清中土拉弗氏菌特异性抗体;并于2005年1月对其发病状况和行为习惯等做回顾性的调查。另外于1986年1月收集已确诊的13名土拉弗氏菌病人的抗凝血,2005年4月提取DNA后,进行套式PCR扩增。 结果 病例组抗体的几何平均滴度(GMT)从1986年的11890逐年下降到2005年46.94,抗体效价衰减率为58.1%。早期抗体水平与后期抗体水平的相关分析系数r=0.659,P<0.05,二者呈正相关。对2005年患者抗体水平的可能影响因素的分析表明,发病时病情轻重和日常行为习惯等均无统计学意义(P>0.05)。对照组历年来抗体检测结果均为阴性。套式PCR法可检测出患者血液中土拉弗氏菌,阳性率为84.6%,对照组细菌套式PCR均为阴性结果。 结论 31例病人中有41.9%(13例)抗体存在至今,但效价水平较低,这表明病人血清的土拉弗氏菌特异性抗体可长期存在,并呈逐渐下降趋势;对1986年1月抗体效价与2005年的抗体效价所作的相关性分析结果为r=0.659,P<0.05,说明后期抗体水平很大程度上受早期抗体效价高低的影响,与其他因素无关;健康对照组均无特异性抗体,显示一般人群无土拉弗氏菌的隐性感染。率先在国内使用了免疫胶体金试剂盒检测抗体,为其他致病微生物血清学检测提供了参考依据。 国内首次采用套式PCR用于土拉弗氏菌病原学诊断,结果提示该技术具有很高的特异性和敏感性,套式PCR-EIA检测的敏感性较电泳法检测的敏感性高10倍,为土拉弗氏菌的快速鉴定提供了有力手段。