结冷胶是近年最有发展前景之一的微生物胞外多糖,已广泛应用于食品、医药和化工等领域。本文以两株各具生产优势的结冷胶生产菌株(产黄色素的Sphingomonas sp.WZW002 以及黄色素缺陷型Sphingomonassp.WZ013)为研究对象,对基于淀粉水解液的发酵工艺进行了研究,以降低生产成本,并探索了结冷胶快速检测方法,以便于发酵过程的监控和产品质量的检测。探索了快速测定结冷胶产量的间羟基联苯法。在该方法的最佳检测条件下,工业级高酰结冷胶和低酰结冷胶浓度均在0～0.20 mg/mL范围内与反应液吸光值具有良好的线性关系。考察了添加葡萄糖对工业结冷胶测定结果的影响。结果表明,当混合液中葡萄糖浓度不高于结冷胶浓度时,对检测结果的干扰影响不显著,因而该法适用于结冷胶纯品以及发酵后期产胶率的快速检测。研究了适合用作结冷胶发酵中的廉价碳源的淀粉水解工艺,确定了淀粉的液化及糖化相关参数,即淀粉浆浓度为200 g/L,耐高温α-淀粉酶用量为60 U/g淀粉,液化时间40 min,液化终点控制在DE(还原糖当量)值15%～20%,糖化酶用量为6×102U/g淀粉,在此条件下,建立了糖化时间与DE值的关系曲线,当糖化6h,DE值即达100%。以Sphingomonassp.WZW002和WZ013为生产菌株,研究了基于淀粉水解液的结冷胶发酵工艺。通过摇瓶试验,比较了不同种类淀粉水解液及多种糖的发酵产胶率,结果表明,玉米淀粉水解液浓度为40 g/L,水解程度达到DE值80%时,结冷胶产量最高,而培养基成本较低。在上述优化的条件下进行5 L罐分批发酵试验,发酵64 h Sphingomonassp.WZW002菌株发酵产胶率达12.5 g/L,粘度17100 mpa·s,Sphingomona sp.WZ013 菌株发酵产胶率达 9.43 g/L,粘度 10940 mpa·s,进一步对Sphingomonas sp.WZW002菌株进行了基于淀粉水解液的5 L罐补料分批发酵,结果表明在发酵24 h补加10 g/L水解程度达到DE值80%的玉米淀粉水解液,最大产胶率可达17.5 g/L,粘度20140mpa·s,与分批发酵相比,产胶率提高了 31.6%。