姜黄素对沙漠干热环境大鼠小肠损伤保护作用及机制的研究

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中暑是由内源性的新陈代谢产热、外源性的高温环境,或两者共同作用下引起的一种继发于热损伤之后的全身炎症反应综合征,并有可能引发多器官功能障碍甚至死亡的疾病。肠道作为人和脊椎动物最大的储菌库和屏障系统是热打击的首发器官,其损伤后造成的内毒素泄露,是诱导热应激向中暑发生发展的始动因素。姜黄素是一种亲脂类的多元酚,目前发现其在治疗多种因素造成的肠黏膜损伤中具有良好的生物和药理活性。本研究通过姜黄素灌胃预处理大鼠,探讨其对沙漠干热环境下大鼠肠黏膜的保护作用及机制,为药物预防沙漠干热环境下中暑的研究提供基础理论依据。雄性SPF级大鼠160只,体重200~230 g,随机分为4组:生理盐水对照组(NC组)、姜黄素低剂量组(LDC组)、姜黄素中剂量组(MDC组)、姜黄素高剂量组(HDC组),每组40只。NC组生理盐水灌胃,姜黄素各组按(50、100、200)mg/kg姜黄素灌胃,连续7天,每天1次。灌胃结束后第1天,将各组大鼠置于实验舱中,温度:(41±0.5)℃,湿度:(10±2)%RH。按0 min、50 min、100 min、150 min时间点,分别随机取出各组大鼠,每组10只。记录核心体温后,留取血液和回肠组织样本。首先,核心体温和肠黏膜病理损伤评分结果显示:在100 min时间点,HDC组核心体温较NC组显著降低(P<0.05),在150 min时间点,姜黄素各组核心体温较NC组显著降低(P<0.05);在100 min、150 min时间点,姜黄素各组病理损伤评分较NC组降低,其中HDC组病理损伤评分较其它3组显著降低(P<0.05)。其次,通过比色法测定肠黏膜CAT、SOD和MDA水平,Western blotting测定肠黏膜HSP70、TLR4、IκB、NF-κB表达,结果显示:在50 min、100 min、150 min时间点,姜黄素各组较NC组CAT、SOD活力增加,MDA含量降低,其中在150 min时间点,HDC组较其它3组CAT、SOD活力显著增加、MDA含量显著降低(P<0.05);150 min NC组较0 min NC组HSP70、TLR4、NF-κB表达显著升高,IκB表达显著降低(P<0.05);在150 min时间点,姜黄素各组较NC组HSP70、IκB表达增加,TLR4、NF-κB表达降低,其中HDC组较NC组HSP70、IκB表达显著增加,TLR4、NF-κB表达显著降低(P<0.05)。最后,ELISA法检测血液中TNF-α、IL-1β、IL-6、LPS浓度,结果显示:150 min NC组TNF-α、IL-1β、IL-6、LPS浓度较0 min NC组显著增加(P<0.05);在150 min时间点,姜黄素各组较NC组TNF-α、IL-1β、IL-6、LPS浓度降低,其中HDC组较NC组显著降低(P<0.05)。以上结果表明,姜黄素预处理通过抑制肠黏膜氧化应激反应和LPS诱导的TLR4-NF-κB信号通路及上调HSP70表达,起到保护沙漠干热环境下大鼠肠黏膜的作用,并通过减轻大鼠肠黏膜损伤,阻断或减少了循环血中内毒素来源途径,抑制了循环血中炎症因子的表达和大鼠核心体温升高,提示姜黄素预处理可缓解中暑引起的多脏器损害,从而降低中暑的死亡率。
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