富血小板血浆对MRSA的体外抑菌实验研究

来源 :西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wwwzjs19890622
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:富血小板血浆(PRP,platelet-rich plasma)及其激活产物富血小板凝胶(PRG,platelet-rich gel)是血液高度浓缩的产物,由于其富含大量的生长因子,在临床上广泛应用于各种软组织的修复。研究表明,血小板可以通过多种方式发挥抗感染效应,然而在诸多的体外研究中,我们发现PRP对某些常见细菌(如大肠杆菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌和肺炎克雷伯杆菌)的抗菌作用结论并不一致。最新有研究认为PRP对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA,methicillin-resistant staphylococcus aureus)也有抗菌效应。本研究拟通过体外抑菌实验,明确健康志愿者全血制备的PRP及其衍生物PRG在体外对MRSA临床菌株有无抗菌效应,初步了解PRP在MRSA感染中的应用价值以便指导临床。方法:获取MRSA临床菌株,接种于哥伦比亚血琼脂平板中,使用营养肉汤于恒温振荡器中增菌后备用。使用含枸橼酸钠的蓝色盖头一次性采血管采集6名健康志愿者肘前静脉血各9ml,在常温下通过手工二次离心法(第一次300×g 10min,第二次700×g 10min)制备PRP,充分摇匀后全自动血细胞分析仪计数全血及PRP中血小板数目。通过分光光度计测定增菌后的菌悬液OD600值,根据OD600值调整细菌浓度,采用预加菌液倾注平板法,用冷却至45℃的MH琼脂培养基(Mueller-Hinton Ager)与MRSA混合后制备20个带菌平板,每个平板均分为4个区域,使用牛津杯打孔法于每个区域正中打孔,挑去孔中培养基后进行体外抑菌实验。每个培养皿中4个孔,分为A、B、C、D四组,A组阳性对照组加入50ul硫酸庆大霉素溶液、B组PRP组加入50ul PRP、C组PRG组加入50ul PRP+5ul葡萄糖酸钙-凝血酶溶液(现用现配)、D组阴性对照组加入50ul灭菌纯水。将培养皿正面朝上放入37℃恒温培养箱中培养12h后取出,用游标卡尺十字交叉法测量各组抑菌圈大小,SPSS 18.0统计软件行统计分析,计量资料使用均数±标准差表示,各组间P值<0.05有统计学意义。结果:6名健康志愿者全血及PRP中血小板数目分别为(161±19.2)×109/L,(876.3±73.3)×109/L,PRP中血小板富集倍数平均为5.4倍,符合PRP制备标准。MRSA于营养肉汤中增菌后测得菌悬液OD600值为1.375,经过倍比稀释后测得细菌悬液OD600值为0.534,再经涂布计数测得稀释后细菌浓度为1.76×109CFU/ml,而对应配置的MH琼脂平板中MRSA的接种细菌浓度为1.76×106CFU/ml。共培养12h后取出可见培养基中细菌分布均匀,抑菌圈边缘规则,边界清晰,识别度高。硫酸庆大霉素溶液组可见到明显抑菌圈出现,其平均抑菌圈直径为(17.15±0.96)mm,PRP组、PRG组、灭菌纯水组抑菌圈直径均为0 mm。结论:1.打孔法与预加菌液倾注平板法结合在PRP的抑菌实验中是一种可行的、简单实用、重复性高的抑菌实验方法。2.健康志愿者静脉全血制备的PRP及PRG对本实验中MRSA临床菌株暂未发现抗菌效应,尽管不断有研究认为PRP可以抑制许多细菌的生长,但在临床实际中,对于某些耐药菌株,这种效应可能是非常微弱的,我们不能夸大了PRP的抗感染效应而忽视了某些感染性疾患本身的治疗。
其他文献
粮油检验工作是与人民生活息息相关的,它是国家经济发展的基础环节之一,只有确保人民日常生活的稳定安全,才能促进国家经济的平稳运行,在实际生活中,我们要确保粮油检验工作
目的探讨耳正负压治疗在儿童分泌性中耳炎治疗中的临床效果。方法选取60例儿童分泌性中耳炎患者,分为对照组(30例48耳)和观察组(30例50耳),对照组采用传统捏鼻鼓气法进行咽鼓
将各个医学诊断编码合成诊断相关组 (DRG) ,是在原先的医学资料分类基础上作的二次诊断。九十年代瑞典的二次诊断数有所增多 ,该年代某些州运用了DRG制。以 1 988- 2 0 0 0年
一氧化二氮,化学式N2O,又名笑气,英国化学家汉弗莱&#183;戴维于1977年发现有麻醉作用的一种无色甜味气体,然后广泛应用于医学,尤其是口腔科和妇产科。然而一氧化二氮的滥用可
<正>丹尼·哈维非常喜欢他在多伦多的办公室,尤其是通过那扇8平方米的大窗户,他可以终年尽情享受灿烂的阳光。最近,他做了一个粗略的计算,加
以大气污染防治重点区域三区十群47个重点城市为研究对象,在考虑非期望产出的情况下构建资源投入-环境治理两阶段工业生产治理模型,采用网络超效率EBM模型测度2016年各城市工
集合与函数是高中数学的重要内容之一,从历年浙江省的数学高考来看,对集合与函数的考查相对稳定,既有小巧灵活的容易题,也有新颖别致的中等题,更有内涵丰富的压轴题,其中不少问题的
目的:研究康妇消炎栓治疗慢性盆腔炎的作用机制。方法:选择48例慢性盆腔炎患者为治疗组,予康妇消炎栓肛塞治疗,疗程为12周,以30例健康女性人群为正常组进行比较。采用酶联免
通过分析施工准备阶段的质量管理对建筑工程项目施工质量的重要性,介绍了施工准备阶段质量管理的主要内容和工作要点,提出了如何加强施工准备阶段质量控制的措施。