目的通过验证PADI4在食管鳞状细胞癌(以下简称为食管鳞癌),癌旁正常组织和食管鳞癌细胞系中的表达水平,结合患者的临床病理资料,探讨PADI4表达水平与临床病理特征的相关性。同时,探究PADI4对食管鳞癌细胞生物学功能的影响及作用机理,验证其作为食管鳞癌诊断和治疗的标志物和靶标的潜力。方法1.从接受食管癌根治性切除术的患者病理标本(包括食管鳞癌和癌旁正常组织)中提取总RNA,进行高通量转录组测序分析;2.使用生物信息学技术筛选差异表达的编码基因;3.实时荧光定量PCR检测73例食管鳞癌及癌旁正常组织中PADI4的表达水平。结合临床病理资料,探讨PADI4表达水平与临床病理特征的关系;4.采用实时荧光定量PCR检测食管鳞癌细胞系中PADI4的表达水平;5.特异性小干扰RNA敲低食管鳞癌细胞中PADI4的表达,通过MTS,细胞平板克隆和Transwell小室探究PADI4对细胞增殖与克隆,迁移和侵袭的影响。结果1.高通量测序数据结果显示,食管鳞癌中存在大量差异性表达的编码基因。相对于癌旁正常组织,食管鳞癌中PADI4显著上调表达,表达倍数变化均大于5.5;2.实时荧光定量PCR结果显示,56例(56/73,76.7)食管鳞癌中PADI4的表达明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05);3.PADI4的表达水平与肿瘤位置(P=0.011)密切相关,与性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、肿瘤分期以及淋巴结转移无明显相关性(P>0.05);4.与癌旁正常组织相比,PADI4在食管鳞癌细胞系中表达上调;5.特异性小干扰RNA干扰表达后,PADI4在食管鳞癌细胞中的表达水平相较于阴性对照组明显降低(P<0.001);6.MTS和细胞平板克隆实验表明,与对照组相比,敲低PADI4表达后细胞增殖和克隆受到显著抑制(P<0.001);7.Transwell小室结果显示,与阴性对照组相比,干扰PADI4表达后细胞迁移和侵袭受到显著抑制(P<0.001)。结论1.食管鳞癌组织中存在大量异常表达的编码基因;2.PADI4在食管鳞癌组织和食管鳞癌细胞系中表达上调,可能是食管鳞癌诊断的潜在生物标志物;3.PADI4的表达水平与食管鳞癌患者的肿瘤位置密切相关(P=0.011),而与性别,淋巴结转移,浸润深度和肿瘤分化程度无关(P>0.05);4.特异性小干扰RNA干扰PADI4在食管鳞癌细胞中的表达后,细胞增殖与克隆,迁移和侵袭均受到明显抑制,这表明PADI4可能在食管鳞癌的发生和发展中发挥致癌基因的作用,并且是治疗食管鳞癌的潜在靶标。