百合远缘杂交及其杂种鉴定研究

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百合是世界五大鲜切花商品之一,但在我国观赏百合的商品化栽培历史较短。目前,我国生产鲜切花的百合种球多数是从荷兰等国家进口。然而,除了云南昆明等少数四季如春的高原区以外,国外的许多商品种不适应在我国夏季高温高湿地区气候条件下栽培,严重影响了百合鲜切花产业的发展。我国丰富的百合野生资源具有明显的耐热抗病性,如何充分利用我国特有的百合野生资源,提高商品种的抗逆性,培育出既适合在我国境内生长又具有自主知识产权的新品种是百合育种的重要目标。本论文以东方百合品种“康斯坦萨”(Lilium’Constanta’,Oriental lily hybrid)×岷江百合(Lilium regale Wilson)、’‘索邦’’(Lilium’Sorbonne’)×泸定百合Lilium sargentiae Wilson)两个远缘杂交组合进行种质创新研究,旨在培育具有较高的夏季耐热性和抗病性的新种质和新品种。开展的从杂交育种、杂种胚拯救以及杂交F1代的早期鉴定等一系列的试验。主要结果如下:1.岷江百合和泸定百合的新鲜花粉萌发率达到90%,均适用于杂交试验。花粉贮藏于常温、4℃、-20℃、-75℃,4个条件对花粉生活力的影响存在较大的差异,-20℃贮藏效果最佳。2.采用了直接授粉、切花柱、切花柱加母本柱头液等方法进行授粉试验,以克服远缘杂交受精前的障碍。研究结果表明,直接授粉杂交的坐果率最高为85%,切花柱加母本柱头液为39%,切花柱为33%。直接授粉法最佳,杂交组合的柱头对花粉排斥小,这两个杂交组合受精前障碍不明显。3.为克服受精后障碍采取胚拯救技术。取材时间为授粉后子房发育20d、30d、40d、50d、60d,以子房切片培养、胚珠培养、胚囊培养三种方法对早期的杂种胚进行培养。子房采集后携至实验室作表面灭菌处理后,横切为0.3cm的子房切片,接种于MS为基本培养基的5种培养基上进行胚拯救培养。以授粉后40d,子房切片培养的效果最佳,黑暗培养有利于被拯救胚诱导成苗。4.用SRAP分子标记对“康斯坦萨”(Lilium’Constanta’,Oriental lily hybrid)×岷江百合(Lilium regale Wilson)杂交组合所得到的杂交后代进行杂种真实性鉴定。采用CTAB法提取DNA,从筛选的56对多态性高,重复性好的引物中随机选用13对引物Mel/Em1、Me4/Em10、Me2/Em1、 Me1/Em5、Me1/Em6、Me2/Em3、Me1/Em8、Me4/Em4、Me1/Em9、Me3/Em8、 Me2/Em2、Me1/Em3、Me1/Em4,都能扩增出父本及母本条带。结果表明,通过子房切片胚拯救培养获得的7个株系均鉴定为真杂种。
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