暗紫贝母(Fritillaria unibracteata Hisao et K.C.Hsia)为四川重要的道地药材之一,含有多种生物碱、皂苷及人体必需的微量元素,其干燥鳞茎具有清化热痰、润化燥痰、止咳、散结消肿之功效,历来备受中医的重视。因其独特生长环境和较长的生长周期,产量很少,价格昂贵,人为过度采挖已造成该品种的野生资源濒临灭绝,而通过植物组织培养的方法可有效解决此问题。本实验以新鲜的暗紫贝母鳞茎为外植体,采用经过低温预处理和添加一定浓度维生素C(Vc)的防止霉变、褐变方法,在不同激素配比浓度下考察其愈伤组织和不定芽的诱导情况。依据最佳诱导培养条件进行外植体离体培养,在培养过程中分不同时间段取样,以贝母甲素为对照品,采用HPLC法测定组培过程中不同生长时期产物生物碱的积累量。组织培养实验结果显示:不定芽最高诱导率为73.3%、愈伤组织最高诱导率为53.3%,以此确定出最佳的培养体系条件为:低温预处理48h、光照16h/d、MS(pH5.8)+NAA1.2 mg/L +6-BA1.6 mg/L+Vc0.1g/L。不同生长时期生物碱的积累量实验结果表明:组培的过程中不定芽的有关生物碱积累呈上升趋势,最高积累量为原种鳞茎的1倍以上,以此确定出组培过程中有关生物碱的最佳积累期为32天左右。暗紫贝母组织培养优化体系的建立,有利于野生川贝母的资源保护和开辟药材资源新途径;组培过程中有关生物碱积累研究,对研究和开发其次生代谢产物、实现中药的现代化进程有重要作用。