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目的:通过观察金水六君煎对慢性阻塞性肺疾病(COPD)阴虚痰饮证大鼠与A549黏液高分泌细胞模型的影响,探讨金水六君煎治疗COPD气道黏液高分泌作用机理。方法:实验一:采用气道内滴入脂多糖+烟熏+糖皮质激素方法复制COPD大鼠阴虚痰饮证模型。观察大鼠病理形态学、肺功能评估COPD模型;大鼠一般状态、血清cAMP、cGMP、ACTH、CORT及红细胞Na+-K+-ATP酶活性评价阴虚状态;气道杯状细胞及黏蛋白MUC5AC评估痰饮情况。实验二:采用气道内滴入脂多糖+烟熏+糖皮质激素方法制备COPD大鼠阴虚痰饮证模型,阿奇霉素及金水六君煎低、中、高剂量进行干预,PAS染色检测杯状细胞数及黏蛋白表达量,RT-PCR及Western法检测肺组织MUC5AC、AQP5基因与蛋白表达。实验三:采用人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导体外A549细胞黏液高分泌,金水六君煎及其拆方含药血清进行干预,CCK8法检测细胞活性,RT-PCR及Western法检测A549细胞MUC5AC、AQP5基因与蛋白表达,Elisa法检测细胞培养液MUC5AC、AQP5蛋白表达。结果:实验一:模型组大鼠肺组织表现出慢性炎症、肺气肿、纤维化等COPD病理改变;肺阻力及肺顺应性较空白组差异无明显统计学意义;血清CORT、cAMP、cGMP含量明显减少(P<0.05),红细胞Na+-K+-ATP酶活性降低(P<0.05);气道杯状细胞数明显增加(P<0.05),MUC5AC表达显著减少(P<0.01)。与模型组比较,养阴组CORT、cAMP、cGMP含量及红细胞Na+-K+-ATP酶活性明显增加(P<0.05),气道杯状细胞数及MUC5AC表达明显增多(P<0.05);金水六君煎组CORT含量明显降低(P<0.01),红细胞Na+-K+-ATP酶活性增加(P<0.05),气道杯状细胞数及MUC5AC表达明显增多(P<0.05);化痰组ACTH、CORT、cAMP、cGMP、红细胞Na+-K+-ATP酶活性、气道杯状细胞数及MUC5AC表达差异无明显统计学意义。实验二:与正常组比较,模型组气道杯状细胞数明显增多(P<0.01),肺组织MUC5ACmRNA表达明显上调(P<0.05),AQP5mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,金水六君煎中剂、高量组能显著下调MUC5ACmRNA表达(P<0.05),金水六君煎中剂量组AQP5mRNA表达明显上调(P<0.01)。余各组AQP5基因及蛋白较正常组均明显降低(P<0.05)。实验三:模型组细胞MUC5ACmRNA与蛋白表达明显增多(P<0.05),AQP5mRNA与蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,金水六君煎组及养阴组MUC5ACmRNA表达明显降低(P<0.05),AQP5mRNA表达明显增多(P<0.05),金水六君煎组及化痰组MUC5AC蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01),化痰组AQP5蛋白表达明显升高(P<0.05)。金水六君煎组及养阴组培养液AQP5蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:1.烟熏联合气道脂多糖滴入及地塞米松肌注构建的模型为COPD痰饮合并肾阴阳两虚病证结合模型。2.纠正黏蛋白/水盐比例失衡可能是金水六君煎治疗COPD气道黏液高分泌的机制之一。3.金水六君煎养阴作用与拮抗糖皮质激素对肾上腺皮质抑制,纠正环核苷酸代谢失调有关。