现代研究发现,石蒜科植物中的抗肿瘤活性成分主要是生物碱。文殊兰(Crinum asiaticum L.var.sincum.Bak)作为石蒜科的代表植物之一,含有非常丰富的生物碱成分并且具备相当广泛的药理作用,例如抗疟疾、去咳止痰、抗心律失常以及降压催吐等功效。目前对文殊兰生物碱的抗肿瘤活性的研究并不深入,因此有必要对文殊兰生物碱成分进行全方面的综合分析,本实验以文殊兰生物碱中强碱性生物碱作为研究对象,通过分离、纯化以及液质联用分析手段推测文殊兰强碱性生物碱浸膏中可能存在的生物碱组分,为文殊兰生物碱的药理研究以及临床使用提供有力的实验依据及参考数据。实验过程分为三个部分进行,首先对文殊兰强碱性生物碱的提取工艺进行优化,之后对提取的文殊兰强碱性生物碱成分进行纯化分离以及液相分析,最后对文殊兰强碱性生物碱成分进行质谱分析,推测出其中可能存在的生物碱种类。实验采用经典化学提取方法进行,采用乙醇溶液提取文殊兰种子粗粉中的生物碱成分,再通过酸溶碱沉的方法除杂,获得强碱性生物碱。首先采用乙酸乙酯萃取出相对碱性较低的生物碱组分,之后将碱水液浓缩获得浸膏。浓缩样品在薄层层析、显色剂、紫外灯光照的共同作用下,初步判断包含生物碱成分。之后通过硅胶柱层析的吸附作用获取不同极性的强碱性生物碱,将洗脱液浓缩过反相固相萃取小柱用以进一步纯化富集生物碱成分。最后通过液质联用仪分析,推测出文殊兰强碱性生物碱中可能存在的生物碱组分。通过正交实验分析,最终确定了文殊兰总生物碱的最佳提取工艺为乙醇浓度85%,提取温度65℃,提取时间3 h。其中液料比为8:1,提取次数为3次。由氧化铝和硅胶薄层层析效果对比发现硅胶对文殊兰强碱性生物碱的展开效果较好,并且在展开剂为水:甲醇=1:2时,可以获得2个生物碱显色点,展开点在紫外灯下具备荧光效果。将硅胶层析柱的洗脱液纯化、浓缩后使用液质联用分析,初步推测组分中可能包含伪石蒜碱(Pseudolycorine),N-甲基石斛季铵碱(N-Methyldendroblum),恩其明(Ungeremine),石蒜胺(Lycoramine),古伦宾(columbin),石蒜碱(Lycorine)等六种活性成分。希望通过进一步的红外光谱以及核磁共振的方法综合分析确定该强碱性生物碱的结构特征,为强碱性生物碱的药理研究提供理论依据。