目的：探讨临床中自拟方通窍明目4号对青光眼性视神经损伤的保护作用及分子学作用机制,为中药方剂对神经元保护提供直接证据。材料和方法：腹腔注射10%水合氯醛(3.8ml/kg)麻醉小鼠,并辅以0.4%盐酸奥布卡因滴眼液局部麻醉,并用复方托比卡胺眼药水术眼散瞳。采用单侧前房注射复方卡波姆溶液的方法在成年SD大鼠上建立慢性高眼压模型。造模成功后,对高眼压—周的大鼠模型,给予通窍明目4号按照低剂量、中剂量、高剂量进行治疗两周,并用维生素B1、B12作为西药对照组治疗。以大鼠慢性高眼压模型视网膜内信号传导与转录激活因子3(stat3)、视网膜神经节细胞、视网膜抗凋亡基因(Bcl-x1)为干预靶点,采用免疫组织化学、免疫印迹、病理组织学观察和细胞超微结构检测等方法,从整体及细胞、基因等多个层次系统地研究通窍明目4号对青光眼的视神经保护作用及分子学作用机制,定量分析比较通窍明目4号的视神经保护作用。两组之间采用独立样本t检验,多组之间比较采用单因素方差分析,p<0.05被认为有差异性,具有统计学意义,p<0.01为具有及其显著的差异性。结果：1.光镜下空白组视网膜十层结构清晰,视网膜神经节细胞清晰可见,无水肿。高眼压后的视网膜早期变厚晚期变薄,隔层结构不清,排列紊乱,空泡状结构增多,节细胞数量减少,炎细胞浸润。经过通窍明目4号治疗后的视网膜损伤明显轻于模型组,视网膜各层结构稍紊乱,节细胞排列松散,可见空泡样变,节细胞数量较模型组增多,网膜病变程度减轻。2.电镜下空白组节细胞及神经胶质细胞结构正常,视细胞内节中线粒体丰富,外节形态结构正常,膜盘排列紧密。高眼压模型节细胞结构模糊,细胞器消失,线粒体肿胀,胞浆空泡变性,突触融合,膜盘溶解。经过药物治疗后空泡变性数量较模型组减少,节细胞膜清晰,胞浆内可见结构基本正常的粗面内质网、线粒体。用药后线粒体水肿减轻,突触结构相对清晰,膜盘融合程度减轻。3.免疫组化及免疫印迹提示：空白组的大鼠视网膜stat3、 Bcl-x1呈低表达,高眼压模型呈现出1W表达轻度上升,3W则表达回落,而经过药物治疗后,表达则明显上升,提示通窍明目4号激活了视神经保护通道。结论：通窍明目4号可以减轻高眼压造成的视网膜病理改变,纠正可逆的变性细胞,减轻高眼压状态下RGCs的凋亡,激活stat3神经通路,上调抗凋亡基因,发挥神经保护作用,这条通路通过整合包括诱导和调节免疫反应,DNA修复、线粒体的修复在内的多种方式发挥作用。因此通窍明目4号对青光眼性视神经、视网膜的损伤有修复作用,改善RGCs的生存微环境,保护未受损的细胞,延缓或阻止部分损伤的细胞继续变性。