中药蛇六谷栽培技术及抑菌抗肿瘤研究

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目的1.建立适合我省魔芋优质高产栽培技术;2.建立蛇六谷中提取葡甘聚糖的最佳工艺;3.通过蛇六谷水煎剂中不同组分的提取,检测最佳抑菌效果的组分;4.通过剂量-效应、时间-效应的分析,筛选抗肿瘤效果较好的萃取组分。方法1.单因素多水平法设定不同种植播期,密度,种芋大小和套种方式,记录各自物候期,株高,出苗率和小区产量等性状,分析栽培条件。2.采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测量葡甘聚糖含量,考察每个因素的影响,再用正交实验法制定提取葡甘聚糖的最佳工艺。3.用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇对蛇六谷水煎剂依次进行萃取后分为四个组分,并采用牛津杯法检测各个组分的抑菌活性,找出最佳活性组分的最小抑菌浓度。4.MTT法研究不同浓度的各萃取组分,对胃癌细胞存活率的影响,倒置显微镜观察其形态的变化,比较各组分的抗肿瘤活性。结果1.在试验范围内,对四个因素分别研究,最佳播期是4月20日;最佳种芋大小为100g;最佳密度选择2000株/亩;最佳遮阴度为一行魔芋三行玉米。2.随着固液比的增加提取率也逐渐增大,在固液比60:1时提取率最大,随后提取率略有减小;随着浸提时间的增加,KGM提取率也随之增加,3h后随着时间的增加提取率增加很缓慢;在30℃~40℃范围内,随着温度的升高,提取率相应增加,40℃后提取率急剧下降。3.各组分的抑菌活性强度为石油醚组分>乙酸乙酯组分>正丁醇组分>水组分。抑菌活性最强的是石油醚组分。4.蛇六谷水煎剂石油醚萃取组分、乙酸乙酯萃取组分对人胃癌细胞MKN45的生长具有抑制作用,且这种作用具有时间-剂量依赖性;蛇六谷水组分、水煎剂正丁醇萃取组分在体外对人胃癌细胞MKN45的生长无明显抑制作用,且与培养时间无关。结论1.对于播期,密度,种芋大小,遮荫度四个因素中,种芋大小和密度的影响最大。通过选择适当的种芋,播期和密度,提高遮阴度等办法可以最大提高生产效益。2.采用正交实验对这三个因素进行考察,温度对提取率的影响最大,其次是浸提时间再次是固液比;提取KGM最佳体系为:固液比60:1,浸提时间3h,浸提温度40℃。3.抑菌活性部位极大可能性在石油醚组分之中,它的最小抑菌浓度为3mg/mL。4.蛇六谷水煎中抗肿瘤的活性部位在石油醚组分和乙酸乙酯组分之中。
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