微生物发酵液对赤潮藻生长的影响

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:QQ2009sunboy
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近年来,赤潮的频繁爆发和影响规模的扩大,给沿海地区带来了严重威胁。在各种防治赤潮方法当中,微生物治理赤潮成为防治赤潮的重点研究方向。本研究首先测定了5种微生物发酵液对2种赤潮藻生长的影响,选择抑藻效果较明显的Ba3菌株发酵液进一步研究不同添加量的抑藻效应。其次采用有机溶剂粗提萃取和大孔树脂分离活性组分,并通过液质联用分析活性物质分子量。最后,通过高通量测序技术比较分析了东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)、塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)、链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)、中肋骨条藻(Skeletonema costatum)、锥状斯氏藻(Scrippsiella trochoidea)5种赤潮藻培养液藻际细菌群落结构组成。主要研究结果如下所述:1.芽孢杆菌和酵母菌发酵液对赤潮藻生长的抑制作用不同发酵时间的Ba1菌株、Ba2菌株、Ba3菌株、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)5种微生物发酵液对2种赤潮藻生长的抑制效果都十分显著,对东海原甲藻的抑制率(>91%)都高于塔玛亚历山大藻(>80%)。在4种不同添加量的Ba3菌株发酵液中实验,各处理组的藻细胞密度呈下降趋势,添加量越多的处理组抑藻效果越明显。经分子生物学鉴定,Ba3菌株属于厚壁菌门(Firmicutes),芽孢杆菌纲(Bacilli),芽胞杆菌目(Bacillales),芽胞杆菌科(Bacillaceae),芽胞杆菌属(Bacillus)。2.Ba3菌株发酵液抑藻组分的分离及活性研究通过有机溶剂粗提萃取实验结果显示,Ba3菌株发酵液的抑藻活性成分主要存在于乙醇的浸提相中、3种有机溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)的水相中;通过透析袋初步分析抑藻物质分子量小于8000;Ba3菌株发酵液粗提液采用了HZ830大孔树脂吸附后,用10%~100%乙醇进行梯度洗脱,获得具有抑藻活性的10%~50%乙醇洗脱组分,其中30%洗脱组分抑藻效果最佳,经LC-MC检测,该组分在5.39min,6.20min出现了波峰,检测到两个化合物分子量大小均为537,推测其为同分异构体。3.5种赤潮藻培养液藻际细菌结构分析通过高通量测序分析技术,发现了东海原甲藻藻际细菌群落含有6门,9纲20目24科28属,主要优势属是Marivita(91.33%),未鉴定的属比例为5.15%;塔玛亚力山大藻藻际细菌群落含有4门7纲19目25科26属,主要优势属是Marivita(83.65%),未鉴定的属比例为9.37%;链状亚历山大藻藻际细菌群落含有7门10纲22目28科33属,主要优势属是Marivita(68.07%),未鉴定的属比例9.83%;中肋骨条藻藻际细菌群落含有5门8纲17目21科25属,主要优势属是Altererythrobacter(48.38%),未鉴定的属比例为34.95%;锥状斯氏藻藻际细菌群落含有6门8纲16目21科28属,主要优势属是Balneola(19.68%),未鉴定的属比例为38.04%。5种赤潮藻培养液藻际细菌群落组成中共有的属10个,东海原甲藻特有的属4个,塔玛亚力山大藻特有的属2个,链状亚历山大藻特有的属8个,中肋骨条藻特有的属3个,锥状斯氏藻特有的属4个。
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