目的: 研究β-内酰胺酶新耐药基因LEN-5的耐药性及其表达产物的各种理化性质和酶特性。通过对新型β-内酰胺酶基因的发现和研究，为此类耐药细菌的检测、治疗及监控提供依据，也为新β-内酰胺酶抑制剂及新抗菌药物的研制和开发提供必要条件，而且为人类对细菌耐药基因的知识增添新的素材，也可为临床治疗这种细菌感染合理应用抗生素、预防和控制耐药菌株的出现和传播以及细菌的流行病学研究提供实验依据和指导。 方法: (1)通过接合试验分析耐药质粒的传播机制； (2)应用PCR法扩增接合子耐药基因片断，并测序，然后利用DNAMAN软件与LEN-5基因进行对比分析； (3)应用碱裂解法提取质粒DNA； (4)把新发现的LEN-5基因连接到PET-26(+)载体，克隆转化到大肠杆菌DH5a和BL21； (5)应用超声破壁法提取β-内酰胺酶； (6)应用等电聚焦电泳测定其等电点； (7)用纸片扩散法比较临床分离株和接合子的耐药性； (8)应用琼脂二倍稀释法检测12种抗生素对临床分离株、结合子和重组菌的最低抑菌浓度(MIC)。 结论: 本课题组首次在深圳市人民医院发现一种新型β-内酰胺酶基因，经世界权威专家确认，此基因被命名为LEN-5，GenBank注册号为(AY633109)，已被收录于美国Lahey临床医学中心的专业网站(http://www.lahey.org/Studies)。 含LEN-5基因产ESBLs肺炎克雷伯菌自然转移能力强，转移后基因稳定表达，耐药性没有改变，会引起广泛流行；耐药基因在抗生素选择性压力下，发生突变的速度很快，LEN-5与LEN-2基因具有98.6％的同源性，只有4个氨基酸的差异；药物敏感试验显示，临床分离株和接合子的耐药性高度吻合；目前亚胺培南是最有效的药物；LEN-5基因重组研究，在诱导剂(IPTG)作用下酶可稳定表达；新LEN-5耐药基因细菌有可能成为引起医院感染流行的危险因素，应合理选用抗生素进行抗感染治疗，严格控制LEN-5耐药基因产ESBLs细菌的传播流行。