论文部分内容阅读
本篇论文由三章组成。第一章论述了30种药用植物体外抗氧化活性筛选工作。第二章依据抗氧化初筛结果,对活性好的帽蕊木和蝉翼藤等植物分离得到的化合物进行抗氧化活性筛选。第三章报道了3种河南产植物挥发性成分研究。第一章30种药用植物抗氧化活性研究采用3种体外抗氧化方法DPPH、ABTS和FRAP对来源于22个科、29个属的30种植物进行了抗氧化活性筛选。从这3种方法测定的结果来看,抗氧化活性较高的植物样品主要分布在茜草科、胡桃科和木犀科。对3种抗氧化方法测定的相同的24个样品的结果分别进行相关性分析,分析结果显示DPPH方法和ABTS方法相关性最高(r=0.6856)。第二章单体化合物抗氧化活性研究一、帽蕊木(Mitragyna rotundifolia Kuntze)为茜草科(Rubiaceae)帽蕊木属(Mitragyna L.)植物。该属植物在民间用途广泛,用于发热、疝气、肌肉疼痛的治疗,并可以驱虫。我们在对帽蕊木植物进行持续研究的过程中,利用DPPH和ABTS方法寻找帽蕊木抗氧化活性成分,并利用各种色谱技术对其乙酸乙酯活性部位进行了分离,得到了6个活性化合物:3,4-二羟基苯甲酸(1),咖啡酸(2),3’,4,5,5’,7-五羟基黄烷(3),3’,4,4’,5,7-五羟基黄烷(4),3,3’,5,5’,7-五羟基黄烷(5),3,3’,4’,5,7-五羟基黄烷(6)。其中,化合物3~6系首次从该属植物中分离得到,化合物5的抗氧化活性最好,IC50值分别为1.40μg/mL(DPPH)和0.56μg/mL(ABTS),并且DPPH和ABTS方法相关性很高(r=0.9681)。二、蝉翼藤(Securidaca inappendiculata Hassk)为远志科(Polygalaceae)蝉翼藤属(Secutidaca)植物。作为传统中药材,蝉翼藤具有抗炎、抗菌、抗风湿的功效。药理研究表明,存在于蝉翼藤中的主要成分-口山酮类化合物,具有抑制单胺氧化酶、细胞毒、抗癌、抗炎、抗肿瘤、抗菌、抗氧化和结核治疗等作用。采用活性跟踪的方法,从具有抗氧化活性的蝉翼藤根氯仿部分分离得到9个化合物,包括8个口山酮类化合物。经波谱数据分析,鉴定它们的化学结构分别为1,2,5-三羟基-6,8-二甲氧基-口山酮(7),1,5-二羟基-2,6,8-三甲氧基-口山酮(8),3,8-二羟基-1,4-二甲氧基-口山酮(9),4,6-二羟基-1,5,7-三甲氧基-口山酮(10),7-羟基-1,2,3,8-四甲氧基-口山酮(11),1,7-二羟基-口山酮(12),4-羟基-3,7-二甲氧基-口山酮(13),1,7-二甲氧基-口山酮(14)和aucuparin(15)。其中化合物7和8为新化合物,9为首次从天然产物中获得,10和12为首次从该属中获得。抗氧化活性筛选结果表明:化合物15在ABTS和FRAP模型中显示出显著的抗氧化活性;化合物7清除DPPH自由基能力最高(IC50值为0.31μg/ml)。ABTS和FRAP两个模型显示高相关性(r=0.9193)。三、在对其他化合物进行抗氧化活性筛选时,发现有5个化合物在DPPH、ABTS和FRAP方法中均具有很高的抗氧化活性。这5个化合物中,化合物16和19未鉴定;有3个结构已确定,依次为5,7-二羟基-2-甲基-吡喃酮(17),松脂素(18)和连翘脂素(20)。其中,化合物16和17在DPPH和ABTS筛选模型中,抗氧化活性均高于阳性对照BHA和BHT,而略低于PG;在FRAP筛选模型中,化合物17抗氧化活性最高,比PG、BHA和BHT抗氧化活性均高,化合物16仅比BHT抗氧化活性高。DPPH和ABTS两个模型显示高相关性(r=0.8425)。第三章三种河南产植物挥发性成分的SPME-GC-MS分析一、小叶女贞(Ligustrum quihoui Carr.)是木犀科(Oleaceae)女贞属(Ligustrum L.)植物。其花含芳香油;叶入药,有清热解毒之功效。采用固相微萃取技术(Solid–phase microextraction,SPME)对小叶女贞花和花蕾挥发性成分进行了研究,发现小叶女贞花的主要赋香成分是苯乙醇和苯甲醇,属于玫瑰花香系列;小叶女贞花可以应用于食用香精和烟用香精,可以作为高级香料进行研究开发;并发现小叶女贞花挥发油中苯甲醇含量比女贞子挥发油中苯甲醇含量高,而苯甲醇可能是小叶女贞挥发油的主要药效成分,具有抗炎、抗菌和镇痛等作用。二、海桐(Pittosporum tobira Ait.)为海桐花科(Pittosporaceae)海桐花属(Pittosporum Banks ex Gaertn.)常绿阔叶灌木,其根、叶和种子均能入药,根能祛风活络、散瘀止痛;叶能解毒、止血;种子能涩肠、固精等。为比较经典的水蒸气提取法和固相微萃取技术方法之间的差异,我们对海桐花和花蕾进行了挥发性成分研究。发现水蒸气蒸馏法和固相微萃取法都能获得一些相同的挥发性成分,同时发现固相微萃取法还能提取出水蒸气蒸馏法不能提取出来的一些成分,并能明显缩短挥发油提取时间。对海桐花和花蕾的挥发性成分进行研究,采用水蒸气蒸馏法时,发现橙花叔醇在花蕾中的含量明显比花中的含量高(高达20.13%),而橙花叔醇具花草样芳香味,可用于香料制造;采用固相微萃取法时,3个主要成分十一烷、壬烷和α-蒎烯在海桐花和花蕾中的含量相差不大,而α-蒎烯有明显的镇咳和祛痰作用,并有抗真菌作用。三、白车轴草(Trifolium repens L.)为豆科(Leguminosae)车轴草属(Trifolium L.)植物。其全草皆可入药,具有祛痰止渴、镇痉止痛等功效。利用SPME方法对白车轴草的花进行了挥发性成分分析。研究结果与文献比较,有较大差异,这些差异可能与挥发油的提取方法有关;也可能是由白车轴草花的产地不同造成的。与常规的水蒸气蒸馏法相比,固相微萃取具有萃取效率高、操作简便、无需溶剂和时间短等优点,是提取白车轴草花挥发性组分的优良方法。