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肝癌是威胁人类健康的主要疾病之一,尤其在中国有较高的发病率,对于其研究有重要意义。肿瘤转移是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因,至今没有找到理想的治疗手段和方法。ELMOs广泛表达于哺乳动物细胞,主要参与细胞趋化转移、细胞极化、凋亡和树突发育等多项生命活动。我们前期研究表明ELMOs在乳腺癌细胞的趋化运动中发挥着重要作用,其中ELMO1通过与Dockl80形成复合物,活化Racl和Rac2从而影响肿瘤细胞的运动和侵袭。在本研究中,我们将ELMO2与肝癌细胞趋化运动相关联,分别应用小RNA干扰技术和慢病毒技术降低及增强ELMO2的表达水平,从而进一步探讨ELMO2不同表达水平对肝癌细胞运动的影响,初步明确ELMO2在肝癌细胞趋化运动和转移中的重要作用,为寻找抑制肝癌转移的新靶点奠定基础。方法：1.采用合成ELMO2的RNAi序列,利用脂质体转染方法获得瞬时转染的肝癌细胞系,然后进行Western Blotting验证,筛出降表达效果最明显的序列片段。2.利用筛选出降表达最有效序列合成降表达ELMO2的慢病毒质粒,再将合成慢病毒质粒通过脂质体转染方法制备慢病毒。3.利用生物信息学方法获得ELMO2基因序列,合成引物制备ELMO2过表达慢病毒质粒,利用同样方法获得过表达ELMo2慢病毒。4.利用制备的降表达ELMO2及过表达ELMO2慢病毒感染肝癌细胞系HepG2,经过药物筛选获得稳转细胞系。5.经Western Blotting验证成功过表达ELMO2及降表达ELMO2的HepG2细胞系进行相关细胞功能学实验,例如趋化、划痕和侵袭以便验证对其趋化及迁移能力的影响。结果：1.利用合成的3个ELMO2的RNAi序列,分别转染肝癌细胞系HepG2,经Western Blotting验证筛出ELMO2-1是最有效的降表达序列。2.利用筛出ELMO2最有效降表达序列构建慢病毒质粒,经过测序验证获得成功,经过脂质体转染方法包装降表达ELMO2慢病毒。3.经生物信息学方法获得ELMO2基因序列,合成过表达ELMO2慢病毒质粒获得成功,同样方法包装得到过表达ELMO2慢病毒。4.利用成功制备的慢病毒感染肝癌细胞系HepG2,经过药物筛选获得过表达ELMO2和降表达ELMO2的稳转HepG2细胞系。5.通过慢病毒感染获得过表达ELMO2和降表达ELMO2的肝癌细胞系,同正常肝癌细胞HepG2对照组相比较ELMO2蛋白表达水平明显升高和降低。6.同对照组相比较,在划痕实验中,过表达ELMO2的HepG2肝癌细胞运动能力增强,而降表达ELMO2的HepG2细胞系运动能力明显降低。7.与对照组相比较,在趋化实验中,过表达ELMO2的细胞能够明显增强CXCL12诱导的肝癌细胞的趋化运动能力,而降表达ELMO2的HepG2细胞系趋化能力明显降低。8.在之后的侵袭实验中,与对照组相比较,过表达ELMO2的HepG2肝癌细胞系侵袭能力明显增强,而降表达ELMO2的HepG2肝癌细胞系侵袭能力明显减弱。结论：1.利用慢病毒方法成功构建过表达及降表达ELMO2的稳转HepG2肝癌细胞系。2. ELMO2参与调控CXCL12诱导的肝癌细胞的运动和侵袭。