论文部分内容阅读
当归Angelica sinensis（Oliv.） Diels作为甘肃特色药材之一,具有补血活血、调经止痛等功能。然而传统的育苗方法必须选用生地,严重破坏了当归产区的原生植被,且周期长,效率低,易受多种病害而使产量降低,品质下降。因此,本研究利用组织培养技术来生产当归苗,一方面为工厂化育苗提供最佳工艺流程,另一方面有望改变传统的生态破坏型育苗方式,抑制药农对生地的开垦使用,保护当地现存的天然植被,提高当归苗的品质。 本实验首先建立了无菌繁殖体系,然后分别以①当归种子萌发所得幼苗的叶柄、根尖和叶片作为外植体,重点研究了不同外源激素配比以及不同培养条件对其器官分化的影响;②利用一年生当归顶芽作为材料,尝试不定芽途径。 结果表明,在外植体表面灭菌后使用50mg/L的抗生素溶液处理30min,效果最为理想,并且,青霉素杀菌效果比庆大霉素强,污染率仅有4%～10%。组织培养阶段,①诱导愈伤组织的最佳培养基为H+0.5mg/L 2,4-D,其中2,4-D是不可缺少的;各种外植体的诱导效果依次为叶柄、根尖、叶片;而且,H培养基较B5和MS更适宜诱导愈伤组织;控制愈伤组织褐化的有效途径是添加0.1%g/LAc并多次转移,褐化程度明显减少。②愈伤组织继代增殖的适宜培养基为MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/LBA或MS+0.05mg/LNAA+0.5mg/LKT。③将增殖后的愈伤组织转移到MS+0.02mg/LNAA+0.1mg/LZT分化培养基上,分化率可达98%。④愈伤组织表面长出的丛芽经增殖和壮苗后,转移到生根培养基1/2MS+1.0mg/LIBA+300mg/LLH+3%白砂糖,2周后,平均每株生根4条,生根率达100%。⑤当归顶芽增殖途径中以MS+5.0mg/LBA+1.0 mg/LIAA组合获得较高的增殖倍数。⑥幼苗生根后,到根长势粗壮时,先强光炼苗7d,再开盖闭光炼苗5d,最后转移到腐殖土+蛭石（1:1）混合的移栽基质中,成活率可达80%。 愈伤组织诱导阶段,光照条件以前期暗培养、后期光培养为宜,温度为23℃;愈伤组织增殖与再分化时,培养温度以22～25℃为宜;生根培养中,温度为20～22℃,前期暗培养后期光培养有利于生根;整个培养期间光照强度为2000～3000Lx,光照时间为16h/d。