【摘 要】
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利用农杆菌(A tumefaciens)介导法将从抗旱、耐盐植物柽柳(Tamarix chinensis)中克隆得到的lea基因(late embryogenesis abundant)转入山新杨,共获得18个卡那霉素抗性芽,对其
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利用农杆菌(A tumefaciens)介导法将从抗旱、耐盐植物柽柳(Tamarix chinensis)中克隆得到的lea基因(late embryogenesis abundant)转入山新杨,共获得18个卡那霉素抗性芽,对其进行PCR检测,均为阳性;RT-PCR检测,表明外源lea基因在RNA水平上能够表达。将转3种基因的山新杨进行0.8%的NaCl胁迫,对转基因株系和对照的丙二醛含量,叶绿素含量以及过氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),抗血酸过氧化物酶(APX),过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶的活性进行了测定。试验结果表明:在胁迫的第4d和第6d转基因株系的叶绿素平均含量分别高于对照的14.28%和16.42%。非转基因小黑杨的MDA含量高于胁迫前的7.74%,各转基因山新杨的平均MDA含量均高于胁迫前的1.69%;胁迫第6d非转基因小黑杨的MDA含量最高,高于胁迫前的87.31%,各转基因山新杨的平均MDA含量高于胁迫前的60.63%。转基因山新杨的4种抗氧化酶活性分析结果如下:(1)APX活性分析表明,盐胁迫的第2d各转基因株系的APX活性达到最大,其中L15和A11植株内的APX活性明显高于对照,分别高于对照的63.09%和48.85%;(2)POD活性分析表明,在胁迫的第4d和第6d,转基因株系L10,P6,P8的POD活性分别高于对照的37.34%,28.39%,28.99%,而在胁迫6d时这些转基因株系的POD活性则分别高于对照的38.6%,19.48%,19.34%。(3)SOD活性分析表明,在胁迫第6d,L15,P1和P8的SOD活性显著的高于对照,分别高于对照的26.36%,27.31%,17.33%。(4)CAT活性分析表明,在胁迫的第2d,各转基因株系的CAT活性(除了A18)均明显高于对照,但在胁迫第4d和6dL15和L14的CAT活性高于对照。采用隶属函数法,利用4种抗氧化酶以及叶绿素和丙二醛等指标对转基因株系的耐盐性进行了综合评价。按照耐盐性高低排列为:L10>A11>P1>L14>A18>P8>P6>A16>P7。
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