硒元素在大鼠梗阻性黄疸时对胆红素的影响

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目的:通过手术结扎Sprague-Dawley(SD)大鼠胆总管建立SD大鼠梗阻性黄疸的模型,初步研究硒元素在大鼠梗阻性黄疸时对胆红素和肝细胞形态变化的影响。方法:60只健康成年雄鼠SD大鼠作为实验对象,体重250±15g,随机分为三组,每组20只:即A组(空白组):虚拟手术对照组;B组(对照组):胆总管结扎+自由饮水喂养组;C组(实验组):胆总管结扎+硒元素喂养组。A组:麻醉成功后常规打开大鼠腹腔只分离胆总管不做结扎,然后逐层关腹,正常饮水喂养;B组:麻醉成功后常规打开大鼠腹腔分离胆总管靠近十二指肠方向双重结扎胆总管,然后关腹,正常饮水喂养;C组:麻醉成功后常规打开大鼠腹腔分离胆总管靠近十二指肠方向双重结扎胆总管,然后关腹,于术后第一天开始灌注富硒康(安徽省华信生物药业股份有限公司生产)每天10mg/Kg和饲料。于术后第2天、4天、6天、8天、10天五个时间分别在三组大鼠中随机挑选4只大鼠,麻醉成功后开腹,腹主动脉取血,检测比较各组大鼠血清总胆红素(TB)、直接胆红素(DB),同时取肝脏组织,进行HE染色观察肝脏组织病理变化。所得数据采用SPSS17.0统计学软件进行数据分析,三组间比较采用单因素方差分析,P<0.05认为差异有统计学意义。本实验数据用平均数±标准差(x±s)描述。显著性检验用t检验。结果:1.成功建立大鼠梗阻性黄疸动物模型。2.在三组大鼠胆红素的比较方面,B组与A组之间差异有统计学意义(P<0.05),C组与A组之间差异有统计学意义(P<0.05),C组和B组相比,各时间点血清TB和DB均显著升高,且趋势较B组减慢(P<0.05)。3.HE染色肝组织形态学观察可见,A组肝小叶及汇管结构正常,无炎症细胞浸润,胆管无明显增生。B组可见,术后第2天大鼠肝组织肝小叶及汇管区周边出现炎性细胞浸润,汇管区可见胆管上皮增厚;术后第4天可见肝组织肝小叶及汇管区炎性细胞大量增多,胆管上皮细胞较前增厚,并可见少量的点、片状坏死灶;之后肝损伤逐渐加重,至术后第8天肝组织出现的片状坏死逐渐增多。C组可见,术后第2天大鼠肝组织肝小叶及汇管区周边出现炎性细胞浸润,汇管区可见胆管上皮增厚。术后第四天至术后第10天与B组相比较肝组织肝小叶及汇管区炎性细胞浸润较轻、胆管增生相对较轻,坏死灶范围相对较少。结论:1.通过结扎大鼠胆总管所致的大鼠梗阻性黄疸模型中,B组大鼠术后早期肝脏表面出现散在的胆红素沉积,随着梗阻时间延长肝脏表面出现片状的胆红素沉积,病理切片见汇管区炎症细胞浸润,胆管增生、出现肝组织点状、局灶状及片状坏死。术后胆红素逐渐升高第8天达到最高值。2.C组于术后第一天开始给大鼠喂养富硒康,C组大鼠早期肝脏外观和B组未见明显差别,随着梗阻时间的持续肝脏便面胆红素的沉积较B组轻,病理切片见汇管区炎症细胞浸润较B组少、胆管轻度增生、出现肝脏点状坏死、小片状坏死,血清胆红素水平升高趋势和B组相比较有所降低,这说明在大鼠梗阻性黄疸时硒元素可使血清胆红素的升高趋势减缓。3.C组大鼠通过喂养硒元素肝组织的破坏较B组轻,证明硒元素对肝脏的损伤具有一定的保护作用。
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