维生素C是指一类具有维生素C活性的物质,包括抗坏血酸及其盐,以及氧化形式的抗坏血酸等。L-抗坏血酸属于维生素C类活性物质,在体内作为辅酶参与多种酶促反应,包括胶原合成、肉碱合成、胆固醇代谢及芳香族氨基酸代谢等。在动物体内,胶原合成与伤口愈合及毛细血管的脆性关系密切,胶原合成能力不足时可导致伤口迁延不愈及毛细血管出血,严重时发生坏血病。L-抗坏血酸还是体内重要的抗氧化剂,可以抗氧化应激损伤,在临床上作为辅助治疗药物广泛应用。D-异抗坏血酸是人工合成的L-抗坏血酸的对映异构体,未在自然界中发现,其抗氧化能力与L-抗坏血酸相当,但维生素C活性远低于L-抗坏血酸。这两种抗坏血酸在食品行业常用作抗氧化添加剂,具有促进食品保鲜和保质的重要作用。然而,近年来越来越多的研究发现L-抗坏血酸及其盐不仅具有抗氧化作用,在很多情况下还具有促氧化的作用,可以增加组织细胞的氧化应激水平,诱导细胞死亡或凋亡,但具体机制还没有完全阐明。本文就其促氧化作用及其机制进行研究,旨在对后续相关基础研究及临床应用提供重要参考。目的：利用抗坏血酸(未注明L-抗坏血酸或D-异抗坏血酸时,指两种中的任意一种,下同)在无糖DMEM中诱导细胞损伤和死亡研究其促氧化作用及其机制。方法：基于体外培养细胞建立了抗坏血酸诱导细胞损伤模型,并加入不同类型的物质(巯基类抗氧化剂、弱还原性氨基酸、除氧剂、糖替代物等)干预该损伤过程,最后通过检测细胞的损伤程度、存活率、氧化应激水半和凋亡情况等揭示抗坏血酸诱导细胞损伤和死亡的机制。结果：0.2mM以上浓度的L-抗坏血酸或D-异抗坏血酸均可在无糖DMEM中诱导PC12、bEnd.3和SH-SY5Y细胞损伤和死亡,而巯基类抗氧化剂NAC和GSH没有诱导细胞损伤的效应；抗坏血酸不能在无糖Earle’s液中诱导细胞损伤和死亡；1g/L的除氧剂亚硫酸钠和1mM的NAC或GSH可以保护细胞免受抗坏血酸在无糖DMEM中诱导的细胞损伤和死亡,但是不能挽救已经受到损伤的细胞；弱还原性氨基酸不能保护细胞免受抗坏血酸在无糖DMEM中诱导的细胞损伤和死亡；脱氢抗坏血酸不能在无糖DMEM中诱导PC12细胞损伤和死亡；抗坏血酸在无糖DMEM中诱导细胞生成大量活性氧,其诱导的细胞死亡多数为凋亡。结论：抗坏血酸在无糖DMEM中诱导细胞损伤的效应没有细胞系特异性,与其还原性、维生素C活性及旋光性均无直接关系；抗坏血酸诱导细胞损伤的条件需要无糖、氧气和DMEM中的营养成分等三个必要条件；在该诱导条件下大量细胞发生氧化应激损伤并凋亡。这些结果提示临床应用抗坏血酸时需要注意特定的使用场合,以免由于使用不当而引起氧化应激损伤。