康健关节葆对家兔膝骨性关节炎模型关节软骨细胞中MMP-1、TIMP-1表达的影响

来源 :陕西中医学院 陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sxj007
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目的:采用免疫组化法测定兔KOA关节软骨细胞中MMP-1、TIMP-1表达的影响,探讨自拟新方康健关节葆对关节软骨修复和保护的可能机制,并阐明该药在改善关节功能和保护关节软骨等方面的作用,为临床治疗KOA提供实验及其理论依据。  方法:1.分组、造模:成年健康新西兰大白兔50只,雌、雄各半,按体重从轻到重进行编号,并随机分成5组。A:空白组,B:模型组,C:氨基葡萄糖组(西药对照组), D:壮骨关节丸组(中药对照组)、 E:康健关节葆组(实验组),每组10只。所有实验的新西兰大白兔在同等条件下饲养一周,无其它不适后,进行造模,除空白组外,余组用4%木瓜蛋白酶0.1ml右膝关节腔内注射,4周后建立兔右膝骨关节炎模型,是目前常用的造模方式。  2.给药方法:在常规喂养一周后,开始造模、给药,A组(空白组):不造模,生理盐水20ml,二次/日,10ml/次,灌服。B组(模型组):只造模,生理盐水20ml,二次/日,10ml/次,灌服。C组(氨基葡萄糖组):氨基葡萄糖液20ml(0.06g/ml)/日,二次/日,10ml/次,灌服。D组(壮骨关节丸组):壮骨关节丸水溶液20ml(0.07g/ml)/日,二次/日,10ml/次,灌服。E组(康健关节葆组):康健关节葆水溶液20ml(0.07g/ml)/日,二次/日,10ml/次,灌服。  3.取材及检测:在实验动物造模4周结束后,分别取各组兔膝关节软骨,行大体肉眼观察、HE染色观察及免疫组化法测定MMP-1、TIMP-1的含量变化,行统计学分析。  结果:1.从实验动物的解剖后,肉眼大体观察显示,模型组兔膝关节软骨具有明显的退行性改变,符合造模的要求,康健关节葆能很好的缓解关节软骨破坏,且比其它对照组效果显著。2.HE染色后光学显微镜观察及兔关节软骨细胞 MMP-1、TIMP-1免疫组化显示:康健关节葆组的 MMP-1表达较模型组明显降低,P<0.01有显著性差异。康健关节葆组的 TIMP-1表达较模型组升高,P<0.05有统计学意义。由此可以说明康健关节葆能降低关节软骨MMP-1的表达水平,对TIMP-1的表达有升高作用,从而延缓或减慢软骨基质的降解、促进软骨修复。  结论:康健关节葆能显著降低OA模型兔关节软骨中MMP-1含量,且对TIMP-1据有升高作用,以减慢及延缓兔膝关节炎中软骨的破坏或降解,能起到改善关节功能的作用。这可能是该药修复受损软骨和保护未受损的软骨机制之一。为康健关节葆在临床治疗OA提供了理论依据。
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