嗜酸乳杆菌对肉鸡EGCs分布、部分免疫功能及抗大肠杆菌感染作用的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:dorisnanjin
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目的:本文以黄羽肉鸡为研究动物,通过研究嗜酸乳杆菌对不同日龄肉鸡的肠胶质细胞(Enteric glial cell,EGC)分布以及嗜酸乳杆菌对感染大肠杆菌的肉鸡肠道EGC分泌的免疫因子IL-1β、IL-2、γ干扰素的影响,为探讨嗜酸乳杆菌对肉鸡肠胶质细胞数量和分布以及对感染大肠杆菌肉鸡EGC分泌的免疫因子的影响提供参考资料,同时为鸡的饲养、疾病预防及治疗提供科学依据。方法:选择160只1日龄的健康黄羽肉鸡,随机分为4组,对照组(CG)饲喂基础日粮;试验一组:基础日粮中添加4%的嗜酸乳杆菌粉(LA);试验二组:大肠杆菌攻毒组(EC)肉鸡,口服10~8 CFU以上大肠杆菌;试验三组:E.coli攻毒后添加4%嗜酸乳杆菌组(EC+LA),肉鸡口服10~8 CFU以上的菌。从7日龄起,攻毒组黄羽肉鸡饮水接种大肠杆菌O1菌株(15×10~8CFU/只),连饮3d,直至鸡只出现临床症状宰杀后迅速取组织样,一部分组织样固定于helly液中用于石蜡切片染色;另一部分组织样置于4%多聚甲醛固定液中,用于免疫组织化学试验,两组取材方法相同。结果:1改良的Holzer染色法观察EGCs的分布及数量,试验组EGCs主要分布在肠道黏膜固有层和黏膜下层,黏膜肌层仅有少量分布,肠绒毛顶端的固有膜中EGCs聚集成群分布,试验组鸡肠道各段EGCs数量较对照组明显增多(P<0.05),各试验组之间EGCs数量差异不显著(P>0.05)。对照组EGCs广泛分布在鸡肠道黏膜层、黏膜下层和肌层,各部位呈分散分布。2免疫组织化学和ELISA试验结果表明,随着鸡日龄的增加,大肠杆菌模型组肠道中IL-1β表达量显著增加(P<0.05),IL-1β在黏膜上皮和固有层强表达。IL-2在粘膜固有层的表达,粘膜下层和肌层弱表达。在致病的E.coli侵袭鸡肠道,IL-2于黏膜上皮、固有层和黏膜下神经丛均有表达。3免疫组织化学和ELISA试验结果表明,对照组IFN-γ在鸡肠道粘膜上皮,固有层及肌层表达。LA组鸡肠道IFN-γ呈弱表达;大肠杆菌攻毒组IFN-γ在粘膜上皮和固有层表达,黏膜下层及肌层呈弱表达。随着鸡日龄的增加,E.coli攻毒添加LA组鸡肠道的IFN-γ表达量明显增加(P<0.05)。结论:日粮添加4%嗜酸乳杆菌可以显著增加肉鸡肠道EGCs的数量;LA组肠道中IL-1β浓度较其他组低,差异显著(P<0.05),大肠杆菌感染组肠道中IL-1β、IL-2和IFN-γ浓度高于未感染组(P<0.05),表明大肠杆菌会使炎症免疫因子浓度增加。随着鸡日龄的增加,添加LA增加了肠粘膜IFN-γ的浓度,且差异显著(P<0.05),嗜酸乳杆菌在致病性大肠杆菌侵染鸡的过程中发挥了免疫增强作用。
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