【摘 要】
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目的:通过对丝素蛋白材料在制备工艺中的条件进行调控改变其结构、亲水性和二级结构,以期能够随之调控改变丝素蛋白材料的力学性能、亲水性、细胞相容性等。从而能够构建口腔颌面部上皮组织缺损修复中所需高强度丝素蛋白膜及多孔丝素蛋白复合支架。表面的丝素蛋白膜用于支撑缝合所需的强度,下层的多孔支架用于促进黏膜生长,诱导上皮角化、血管化。方法:本文实验通过对新鲜再生的丝素蛋白水溶液进行一定的物化处理,通过浓缩处理
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目的:通过对丝素蛋白材料在制备工艺中的条件进行调控改变其结构、亲水性和二级结构,以期能够随之调控改变丝素蛋白材料的力学性能、亲水性、细胞相容性等。从而能够构建口腔颌面部上皮组织缺损修复中所需高强度丝素蛋白膜及多孔丝素蛋白复合支架。表面的丝素蛋白膜用于支撑缝合所需的强度,下层的多孔支架用于促进黏膜生长,诱导上皮角化、血管化。方法:本文实验通过对新鲜再生的丝素蛋白水溶液进行一定的物化处理,通过浓缩处理、浓缩时的温度和速率控制、甘油添加比例控制等方法从而制备出高机械强度的丝素蛋白甘油膜,并结合丝素蛋白甘油冻干多孔支架形成的复合支架,通过傅立叶变换红外光谱仪(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)对丝素蛋白复合材料的形貌进行表征。水接触角仪(WCA)以及力学测试仪表征纤维膜的理化性质。将人永生化角质形成细胞(HaCat)及人表皮成纤维细胞(XTW)分别接种于丝素蛋白甘油膜及丝素蛋白甘油冻干多孔支架上,使用CCK-8法,并对细胞进行荧光染色标记形态,用以考察材料对细胞增殖的影响和细胞的相容性。构建兔口腔黏膜缺损模型和背部皮肤缺损修复模型,以评价复合支架在促进黏膜的愈合中的能力。动物实验证实该多孔复合支架在促进愈合,减少瘢痕,形成完善的上皮多层复合结构中的良好表现。结果:实验证明,经过浓缩处理后的原液再添加甘油最终制备的丝素蛋白材料可以显著增加机械性能,抗拉伸强度大大提高。在制备中使用简便的常温风干过程可以使得材料机械性能进一步增强。但随着添加甘油比例的升高,材料机械强度载荷能力有所降低。双相复合支架更能够在细胞实验中表现良好的生物相容性,充分提供细胞生长增殖的外环境,能够在动物实验中表现出良好的促进创面的愈合的能力。结论:充分利用丝素蛋白为原材料,利用简单的甘油比例梯度添加可以实现对丝素蛋白膜及多孔支架的形态改造,这种共混溶液制备的丝素蛋白-甘油膜其力学性能(包括拉伸、延展以及撕拉等)将较丝素蛋白原溶液制作的膜有大幅度的提升,形态平整光滑、柔软、延展性优越、应变较大,可以达到与黏膜匹配的拉伸强度,以及多孔材料模拟细胞外环境的三维效果,两者结合可以实现较好的软组织修复性能,不但能极大的加速创面愈合,同时可以提高创面愈合的质量。
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